益腎填精、補鈣壯骨中藥復(fù)方對骨形成蛋白

益腎填精、補鈣壯骨中藥復(fù)方對骨形成蛋白

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1、益腎填精、補鈣壯骨中藥復(fù)方對骨形成蛋白【摘要】目的研究益腎填精、補鈣壯骨中藥復(fù)方對骨形成蛋白-4(BMP-4)誘導(dǎo)成骨信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的調(diào)控作用。方法將雌性P-4和Smad5、6mRNA表達。結(jié)果與模型空白組比較,中藥復(fù)方各劑量組股骨骨密度顯著升高(P<0.01);骨組織BMP-4、Smad5mRNA表達水平明顯升高(P<0.01),Smad6mRNA表達水平明顯降低(P<0.01)。結(jié)論益腎填精、補鈣壯骨中藥復(fù)方可明顯上調(diào)BMP-4和Smad5mRNA表達,下調(diào)Smad6mRNA表達?!娟P(guān)鍵詞】骨質(zhì)疏松癥;骨形成蛋白-4;信號轉(zhuǎn)導(dǎo);Smads蛋白Abstrac

2、t:ObjectiveTostudytheregulatingeffectofplementingcalciumandinvigoratingkidneymethodonthebonemorphogeicprotein-4(BMP-4)andsignaltransductionmechanism.MethodsFemaleD)offemoralboneinvitroeterandtheexpressionofBMP-4andSmad5,6mRNAerasechainreation(RT-PCR).Resultsparedodelrats,BMDoffemor

3、alboneinChinesemedicinegroups(highdose,middledose,load5mRNAincreasedobviously(P<0.01),andtheexpressionofSmad6mRNAdecreasedobviously(P<0.01).ConclusionsNanometercalciumandinvigoratingkidneyChinesemedicinecanincreasetheexpressionofBMP-4andSmad5mRNA,anddecreasetheexpressionofSmad6mRNA

4、.Keyorphogeicprotein-4;signaltransduction;Smadsprotein骨質(zhì)疏松癥是一種全身代謝性疾病,其病理機制十分復(fù)雜,是由多種細(xì)胞、激素和生長因子參與、互相交織而成的復(fù)雜網(wǎng)絡(luò)。骨局部生長因子以自分泌和旁分泌的形式直接作用于骨細(xì)胞,能促進細(xì)胞增殖、分化及基質(zhì)合成,對骨折修復(fù)的啟動、發(fā)育、調(diào)控及塑形均有重要作用[1]。在眾多骨生長因子中,骨形成蛋白(BMP)最受矚目,它與骨誘導(dǎo)關(guān)系最為密切。在BMPs誘導(dǎo)骨形成過程中,BMP-Smad信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路是最主要的信號通路。本研究通過檢測去卵巢大鼠BMP-4及其受體調(diào)節(jié)性Smad

5、5、抑制性Smad6信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子的基因表達變化,探討益腎填精、補鈣壯骨中藥復(fù)方對BMPs誘導(dǎo)成骨信號轉(zhuǎn)導(dǎo)機制的調(diào)控作用?,F(xiàn)報道如下?! ?實驗材料  1.1動物雌性arker(TaKaRa公司),BMP-4,Smad5、6,β-actin引物(由TaKaRa公司合成),TaKaRaRNAPCRKit(AMV)Ver.3.0試劑盒(TaKaRa公司)?! ?.3儀器XR-36型雙能X線骨密度儀(美國,NORLAND),BiometraPCR擴增儀(德國),DU640核酸蛋白分析儀(美國,Beckman),ChemiImager5500凝膠電泳成像分析系統(tǒng)(美國

6、,AlphaInnotech)。  1.4藥物益腎填精、補鈣壯骨中藥復(fù)方制備:取長山島大連灣牡蠣,洗凈,曬干。采用納米制備技術(shù)粉碎,最終平均粒徑達到780nm左右,小于100nm的粒徑占10%左右。在制備過程中采取封閉和在線監(jiān)測等措施避免顆粒污染和保證合適的顆粒尺寸分布。所得牡蠣鈣微粒與補腎中藥(鹿茸等)微粉按照1∶1的比例混合,即得本實驗用中藥復(fù)方。牡蠣碳酸鈣咀嚼片(東盛科技啟東蓋天力制藥股份有限公司,國藥準(zhǔn)字:H32025394)。骨疏康顆粒(東港市康辰制藥有限公司,國藥準(zhǔn)字:ZF20000347)?! ?實驗方法  2.1分組及造模將實驗動物按體重分層

7、隨機分為7組:正常組、模型空白組、牡蠣鈣補腎中藥復(fù)方低劑量組、牡蠣鈣補腎中藥復(fù)方中劑量組、牡蠣鈣補腎中藥復(fù)方高劑量組、骨疏康顆粒組、牡蠣碳酸鈣咀嚼片組(以下簡稱為正常組、模空組、實驗低劑量組、實驗中劑量組、實驗高劑量組、骨疏康組、牡蠣碳酸鈣組),每組15只。除正常組外,余者進行造模處理,大鼠經(jīng)腹腔注射鹽酸氯胺酮0.2mL/250g進行麻醉,將之以俯臥姿勢固定于自制手術(shù)架上,從大鼠髂嵴頂部外上方1cm左右,腰椎骶棘肌兩側(cè)入路切除大鼠雙側(cè)卵巢,術(shù)后肌肉注射青霉素0.4mL/250g,連續(xù)3d?! ?.2給藥造模10d后開始給藥。實驗低劑量組給藥量為每日0.7g/

8、kg,實驗中劑量組為每日2.1g/kg,實驗高劑量組

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