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1、蠅蛆殼聚糖急性毒性實驗論文覃容貴吳建偉國果付萍【摘要】目的觀察蠅蛆殼聚糖的急性毒性反應。方法蠅蛆殼聚糖以最大濃度及最大給藥體積的藥液灌胃連續(xù)給藥3次。連續(xù)觀察14d，記錄小鼠毒副反應情況。蠅蛆殼聚糖腹腔注射給藥1次，連續(xù)觀察14d，記錄小鼠毒副反應情況。結果觀察14d,灌胃給藥全部動物健存，小鼠體重與空白對照組差異無顯著性，未見任何毒性反應。計算蠅蛆殼聚糖最大給藥量為2700mg/kg體重，相當于成人日用量的67.5倍。腹腔注射給藥亦未見任何毒性反應。結論蠅蛆殼聚糖毒性較小。【關鍵詞】蠅蛆殼聚糖小鼠急性毒性甲殼素是地球上除纖維素之外最豐
2、富的天然高分子聚合物。殼聚糖是甲殼素的脫乙酰化產(chǎn)物，是一種具有重要開發(fā)價值的天然多糖物質(zhì)。殼聚糖以其獨有的特性日益成為全世界研究的熱點.freell注射器、灌胃針。1.4統(tǒng)計學處理應用SPSS13.0統(tǒng)計軟件，各組數(shù)據(jù)均以±s表示，各項指標組間差異的顯著性比較采用IndependentSamplesTTest。2方法2.1灌胃的最大耐受量實驗2.1.1動物分組取小鼠40只,體重18～22g，按體重隨機分成兩組，即蠅蛆殼聚糖給藥組和蒸餾水對照組，每組20只，雌雄各半。以每籠5只飼養(yǎng)。2.1.2藥物配制蠅蛆殼聚糖臨用前用蒸餾水稀釋至所需濃度
3、，以其能保持較好的流動性及可操作性，配制最大濃度為:33mg/ml。2.1.3給藥途徑和容積按每10g體重0.3ml藥液，分別于上午8時、10時和12時灌胃給藥，共連續(xù)給藥3次。累計給藥劑量為2700mg/kg。給藥前禁食12h，正常飲水。給藥量計算方法如下。單次灌胃容積(ml)=〔動物體重(g)×0.4〕/10單次灌入的藥量(g)=單次灌胃容積(ml)×0.03相當于人用量的倍數(shù)=(灌入的總藥量×50×1000)/(動物體重×22)小鼠的最大耐受量=每只小鼠的耐受藥量小鼠平均體重(20g)×成人平均體重(50000g)成人每日用量2.
4、1.4觀察毒性反應給藥前后應觀察體重、進食、進水的情況，密切觀察異常毒性癥狀，觀察癥狀包括：①行為活動：不安定、多動、發(fā)聲；②神經(jīng)系統(tǒng)反應：舉尾、震顫、痙攣、運動失調(diào)、姿態(tài)異常；③自主神經(jīng)系統(tǒng)反應：眼球突出、流涎、流淚、排尿、下瀉、豎毛、皮膚變色、呼吸；④死亡。每日記錄體重、毒性反應和死亡情況，在給藥第1天每隔30min到1h觀察1次,以后每天觀察并稱體重1次，連續(xù)觀察14d，記錄動物毒性反應及死亡分布情況。以體重變化、反應情況綜合評價實驗結果，以不產(chǎn)生死亡的最大劑量為最大耐受量，推算出相當于臨床用藥量的倍數(shù)。2.2腹腔注射的急性毒性實
5、驗取20只小鼠,體重18～22g，雌雄各半。實驗前12h禁食，不禁水，用配制濃度為30mg/ml的殼聚糖藥液進行腹腔注射，每只小鼠注射量為0.3ml(相當于900mg/kg)。給藥后即刻觀察動物的反應情況，包括動物外觀、行為活動、精神狀態(tài)、食欲、大小便及其顏色、皮毛、鼻、眼、口有無異常分泌物以及死亡情況。在給藥第1天每隔30min到1h觀察1次，以后每天觀察，連續(xù)觀察14d，記錄動物毒性反應及死亡分布情況。3結果3.1灌胃的最大耐受量實驗3.1.1存活情況20只小鼠殼聚糖藥液按900mg/kg劑量灌胃后，無一死亡，繼續(xù)觀察14d，全部存
6、活。3.1.2體重變化藥后14d內(nèi)小鼠活動、進食，排泄均正常，生長良好，毛色光亮，體重增加，無死亡。其平均體重均隨實驗時間的延長而增加，與相應時間的空白對照組相比，差異無顯著性意義(P0.05)。見表1和圖1。表1小鼠經(jīng)口服蠅蛆殼聚糖最大給藥量后體重變化情況（略）與空白對照組比較，▲P0.05；n=103.1.3對臟器的影響觀察期結束處死動物，尸體肉眼觀察,殼聚糖給藥組和對照組小鼠心、肝、脾、肺、腎等臟器外形、大小正常，切面均未見異常變化。3.1.4最大耐受量測定20只小鼠各經(jīng)殼聚糖藥液3次灌胃總量為54mg,相當于臨床成年人給藥口服劑
7、量的67.5倍。成年人的擬口服用量為2g/d。按公式計算:小鼠的最大耐受量=每只小鼠的耐受藥量小鼠平均體重(20g)×成人平均體重(50000g)成人每日用量=(0.054/20)×(50000/2)=67.53.1.5毒副作用20只蠅蛆殼聚糖灌胃小鼠無1例死亡,全部存活,且無明顯毒副反應。蠅蛆殼聚糖最大給藥劑量可達2700mg/kg。3.2腹腔注射的急性毒性實驗3.2.1存活情況20只小鼠殼聚糖藥液按900mg/kg劑量腹腔注射后,無一死亡,繼續(xù)觀察14d,.freell(相當于一次注射給藥量900mg/kg)無一例死亡,全部存活,且
8、無明顯毒副反應。4小結蠅蛆殼聚糖的經(jīng)口急性毒性實驗中，按最高濃度(每毫升溶液中含有蠅蛆殼聚糖30mg)及小鼠最大的灌胃容量(0.3ml/10g)計算用藥劑量為2700mg/kg，相當于成人每日常用量的67.
