苦豆子總生物堿對ccl4所致小鼠急性肝損傷的保護作用

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1、苦豆子總生物堿對CCI4所致小鼠急性肝損傷的保護作用陳娟(江蘇省南通市衛(wèi)牛高等職業(yè)技術(shù)學(xué)校226007)【摘要】目的觀察苦豆子總生物堿對CCI4所致小鼠急性肝損傷的保護作用。方法采用酸水提取法提取苦豆子總生物堿,作用于0.1%CCI4誘導(dǎo)小鼠急性肝損傷模型,觀察不同濃度總牛物堿對CCI4所致小鼠急性肝損傷的保護作用。結(jié)果與正常組比較,模型組小鼠血清ALT、AST活性顯著升高;與模型組比較,給藥組中劑量組小鼠血清中ALT活性降低(p<0.01),AST活性不降低(p>0.05),高劑量組、低劑量組小鼠血清中ALT、AST活性無顯著

2、性差異(p>0.05)o結(jié)論苦豆子總生物堿對CCI4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷有保護作用?!娟P(guān)鍵詞】苦豆子總牛物堿肝損傷【中圖分類號】R96【文獻標(biāo)識碼】A【文章編號】2095-1752(2014)09-0172-02苦豆子為豆科槐屬植物苦豆子SophoraalopecuroidesL.的種子,性寒,味苦,有小毒,具有清腸燥濕的功效,主治痢疾、腸炎等。苦豆子主產(chǎn)于內(nèi)蒙古、甘肅、新疆、山西、寧夏、青海等地⑴。近年來,對苦豆子全草的藥理作用研究得較為深入,發(fā)現(xiàn)苦豆子全草具有中樞抑制、抗炎及抗變態(tài)反應(yīng)、抗心律失常及正性肌力、抗氧化作用等⑵。本實驗

3、采用酸水提取法從苦豆子種子中提取生物堿,作用于0.1%CCI4誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷模型,考察苦豆子總生物堿對0.1%CCI4所致小鼠急性肝損傷的保護作用,為擴大藥源做基礎(chǔ)性研究。1.材料與儀器1.1材料苦豆子,購于安徽省亳州藥材市場,并經(jīng)生藥鑒定后供實驗之用。四氯化碳(分析純,上海長江化工廠生產(chǎn),批號:20080512),聯(lián)苯雙酯滴丸(浙江醫(yī)藥股份有限公司新昌制藥廠,批號:110524),ALT檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號:20110420),AST檢測試劑盒(南京建成生物工程研究所,批號:20110520)o1.2實驗動物雄性

4、ICR小鼠,體重18?22g,安徽醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供,動物許可證號:皖動準(zhǔn)字02號。1.3主要儀器KQ-300DB超聲波清洗儀(昆山市超聲有限公司),低速離心機(上海安亭科學(xué)儀器廠),日立7020自動分析儀(日本日立公司)。1.方法2.1藥液配制取苦豆子粗粉100g,加10倍量0.5%硫酸溶液,超聲提取5h,濾過,濾液用石灰乳調(diào)pH值為7,調(diào)整不同的濃度,備用[3]。取聯(lián)苯雙酯滴丸200粒,加蒸惚水300ml溶解成混懸液,備用。精密吸取CCI40.1ml,加花生油100ml,超聲30min混勻,備用⑷。2.2實驗方法取ICR小鼠60只

5、,隨機分為6組,每組10只,分別為:正常對照組(蒸徭水10ml/kg),模型組(蒸館水10ml/kg),陽性對照組(聯(lián)苯雙酯混懸液150mg/kg),高劑量組(10g/kg),中劑量組(5g/kg)和低劑量組(2.5g/kg)o上述藥液濃度均以相當(dāng)于原生藥量計⑸。每日灌胃給藥1次,連續(xù)投藥7d,最后1次給藥lh后,除正常組外,每組腹腔注射0.1%CCI4溶液0.1ml/10go禁食16h,眼眶取血,分離血清,作ALT、AST活性測定[6]。2.3統(tǒng)計學(xué)方法ALT>AST數(shù)據(jù)采用雙側(cè)t檢驗,用x?±s表示。2.結(jié)果與正常組比較,

6、模型組小鼠血清ALT、AST活性顯著升高;與模型組比較,給藥組中劑量組小鼠血清中ALT活性降低(p<0.01),AST活性不降低(p>0.05),高劑量組、低劑量組小鼠血清中ALT、AST活性無顯著性差異(p>0.05),結(jié)果如表1所示:表1苦豆子總生物堿對CCI4所致急性肝損傷小鼠血清中ALT、AST活性的影響(n=10)與模型組比較,**p<0.01,*p<0.05,與正常對照組比較,△△p<0?01,△p<0.054?討論CCI4是建立肝細(xì)胞損傷模型的常用藥物,CCI4可通過P450酶系統(tǒng)脫鹵

7、素后形成CCI3,后者能從不飽和脂肪酸分子中奪取氫離子,引起脂質(zhì)過氧化,使肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞、肝細(xì)胞內(nèi)酶外逸、細(xì)胞存活率下降⑺?,F(xiàn)代研究表明,一般認(rèn)為ALT活性上升作為肝細(xì)胞漿膜損傷的標(biāo)志,而AST活性上升作為線粒體損傷的重要指標(biāo)⑻。本研究成功地復(fù)制了CCI4所致小鼠急性肝損傷模型,并發(fā)現(xiàn)苦豆子總生物堿中劑量組對CCI4所致急性肝損傷有明顯的保護作用,能顯著降低CCI4所致急性肝損傷小鼠血清中ALT的活性,說明苦豆子總生物堿具有保肝降酶的藥理活性,但效果不如陽性組明顯。我們推測苦豆子總生物堿可能是通過修復(fù)肝細(xì)胞漿膜損傷而產(chǎn)生保肝作用,而對于線粒

8、體損傷無明顯修復(fù)作用,其確切機制還待今后進一步研究。與模型組比較,苦豆子總生物堿高劑量組ALT、AST的活性無明顯降低,可能與苦豆子有小毒有關(guān),在開發(fā)制劑的過程中應(yīng)充分考慮到苦豆

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