植物基因克隆技術(shù)研究進(jìn)展

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1、第’卷第#期.專輯/生命科學(xué)研究?>4&’@>&#.0ABB4&/#$$%年"月C:D30=:3;=3E3F39G=HIA;3#$$%!!"生命科學(xué)研究#$$%年植物基因克隆技術(shù)研究進(jìn)展李敏!!，#，李靖!J李煥秀（!&四川農(nóng)業(yè)大學(xué)林學(xué)園藝學(xué)院J中國四川雅安"#1$!%；#&西南農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝林學(xué)院J中國重慶北碚%$$$%1）摘要：隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，基因克隆技術(shù)已普及&主要介紹了定位克隆技術(shù)、轉(zhuǎn)座子標(biāo)簽技術(shù)等’種植物基因克隆的方法，對各種方法的原理、應(yīng)用及研究進(jìn)展進(jìn)行了闡述&關(guān)鍵詞：植物；基因克隆技術(shù)；生物技術(shù)中圖分類號：()%*&#文獻(xiàn)標(biāo)

2、識碼：+文章編號：!$$,-,’%,.#$$%/0$-$!!"-$1!"#$%&’()*+’%’,-)%’.%/-$%0!，CPRA9;-S:A!J#，CPI:;T!CPQ:;.!&#$%&’(%)"*+,$%(-./0(/%&1$00&2&3!-.4/"*52%-./0(/%"06*-7&%’-()38""*"#1$!%J!-.4/"*314-*"；#&,$%(-./0(/%&"*+9"%+&*’1$00&2&3:-*"*52%-./0(/%"06*-7&%’-()3;&-<&-%$$$%1，14$*2=-*2314-*"/!3(04$&0

3、：U:VHVH3W3X34>B83;V>DY:>4>T:=94V3=H;>4>TZ，T3;3=4>;3:FX3GZB>BA49G:;B49;V&7:THVT3;3=4>;3V3=H;>4>T:3F，F(xiàn)A=H9FV3=H;:[A3F>DB>F:V:>;94=4>;:;T9;WVG9;FB>F>;V9TT:;T9G3G3X:33W&Q>G3>X3GJF>83BG>Y438F3S:FV:;T:;Y:>V3=H;>4>TZ9G39;94Z]3WYG:3D4Z&2H3H>VFB>VF9;WW:G3=V:>;9G394F>BG>FB3=V3W&5’67

4、)4"(：B49;V^T3;3=4>;3V3=H;>4>TZ^Y:>V3=H;>4>TZ.>-?&!.-&*.&@&’&"%.4J#$$%J’.!/5!!"_!#$/1/,2擴增克隆近年來，我國的生物技術(shù)有了較快的發(fā)展，克隆抗蟲、抗病、抗雜草以及提高植物品質(zhì)的基因已LME擴增克隆是一種已知植物基因序列的達(dá)##種，而且很多轉(zhuǎn)基因作物已進(jìn)入田間試驗階基礎(chǔ)上進(jìn)行基因序列克隆的一種方法&根據(jù)已知段&我國的番茄和辣椒現(xiàn)已有1種轉(zhuǎn)基因品種投的基因序列合成一對引物，從植物中提取K@+進(jìn)入商品化生產(chǎn)&由于多種植物高密度分子標(biāo)記、行LME擴增，然后對擴增的片段

5、進(jìn)行純化并連接連鎖圖譜的構(gòu)建、大片段K@+克隆系統(tǒng)的建立、到合適的載體上，用酶切分析和序列分析檢測重序列測定技術(shù)和基因遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)的發(fā)展，許多組子，并與已知的基因序列進(jìn)行比較鑒定&如：N!O未知基因的克隆都將成為可能&小麥上的!!!"基因序列；玉米上的富含甲硫收稿日期：#$$%-$*-!1；修回日期：#$$%-$1-$’基金項目：四川省教育廳“生物技術(shù)專項”基金作者簡介：李敏（!),)-），女，山東菏澤人，四川農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士，主要從事蔬菜抗病基因的分離及克隆研究，23456’"-$’*1-#’’*1)#，7-89:454:8:;%#’

6、=>8第#期李敏等：植物基因克隆技術(shù)研究進(jìn)展!!"氨酸的蛋白及編碼基因；王廣立等克隆的水稻取兩種細(xì)胞的L0./I反轉(zhuǎn)錄后成為兩種-&./；’#(等)!$%&醇溶蛋白基因#）以一定的引物作隨機聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（120）；9）通過擴增產(chǎn)物的電泳分析，分離出不同樣品間!表型基因克隆法的差異條帶；:）將差異&./做成探針；8）在-&./’N(目前，有很多植物既不了解它的基因產(chǎn)物，也文庫或基因組文庫中篩選基因并作功能分析，現(xiàn)沒有對它們進(jìn)行基因定位，但已知植物在表現(xiàn)型上在已被成功地應(yīng)用到玉米、小麥、擬南芥等作物中)存在著差異，利用表現(xiàn)型差異或組織器官特異表

7、達(dá)如：玉米的M個雌雄花序中差異表達(dá)的F/&4O

8、0/1）、順次差異顯示法（Q&&）、表型基因克隆法帶動了許多新技術(shù)的發(fā)展，如：基因組差異顯示法（6&&）等)-&./差式分析法（0&/）；標(biāo)簽接頭競爭120技(功能