《疫學(xué)檢查》PPT課件

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1、免疫學(xué)檢查復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院診斷學(xué)系鄒和建http://www.hjzou.comE-mail:mail@hjzou.com免疫學(xué)檢查的應(yīng)用范圍1．感染性（傳染性）疾病的診斷2．腫瘤免疫學(xué)檢查3．免疫功能評(píng)價(jià)（免疫缺陷）4．自身抗體檢測(cè)廣泛用于疾病診斷、機(jī)理研究、疾病預(yù)防。免疫學(xué)檢查的特點(diǎn)1．主要檢測(cè)特異性或非特異性的抗原、抗體或免疫活性細(xì)胞，或參與免疫的其它成分。2．是疾病診斷的間接方法3．交叉性、延時(shí)性--正確解釋結(jié)果4．正常值問(wèn)題5．是一項(xiàng)具有廣泛應(yīng)用及發(fā)展前途的學(xué)科。臨床免疫（免疫診斷）的學(xué)習(xí)方法基本原理

2、：ELISA，凝集反應(yīng)……每項(xiàng)檢驗(yàn)的檢測(cè)目標(biāo)是什么如何評(píng)價(jià)檢驗(yàn)結(jié)果常用血清學(xué)檢驗(yàn)一、傷寒、副傷寒血清學(xué)診斷*1.肥達(dá)氏（Widal）試驗(yàn)原理：檢驗(yàn)傷寒、副傷寒抗體O-菌體甲H-鞭毛乙H抗原Vi-體表丙評(píng)價(jià):正常人有一定滴度凝集價(jià)（接種、交叉感染）TO>1:80TH>1:160甲、乙、丙H>1:80動(dòng)態(tài)4倍以上延時(shí)性1周10%2周60%～70%4周90%陰性結(jié)果解釋2.酶聯(lián)免疫試驗(yàn)（ELISA）Enzyme-linkedimmunosorbantassay原理：間接ELISA檢測(cè)IgM抗原：傷寒桿菌脂多糖、Vi抗原評(píng)

3、價(jià)：抗體出現(xiàn)較肥達(dá)氏反應(yīng)早，1周正常人陰性或1:20以下Vi抗體陽(yáng)性1:20以上，提示慢性帶菌者。3.膠乳凝集試驗(yàn)原理：檢測(cè)抗原抗Vi、O、H抗體+膠乳顆粒--膠乳抗體與血、尿中抗原反應(yīng)，出現(xiàn)凝集反應(yīng)。評(píng)價(jià)：正常人為陰性或O<1:80，H<1:160早期檢測(cè)。二、斑疹傷寒血清反應(yīng)Weil-Felix（外-斐氏反應(yīng)）原理：檢測(cè)抗體變形桿菌OX19、OX2、OXk與立克次體有交叉抗原性三、Brucellaceae菌病血清反應(yīng)原理：檢測(cè)特異性抗體用牛Brucellaceae菌作為診斷菌液凝集反應(yīng)評(píng)價(jià)：*2周后出現(xiàn)抗體*3

4、~5周1:160以上四、抗鏈球菌溶血素“O”*原理：A族溶血性鏈球菌鏈球菌溶血素O（streptolysinO)紅細(xì)胞破壞評(píng)價(jià)：*正常ASO<400U*感染后1周上升，4～6周80%陽(yáng)性*高Ch、巨球蛋白血癥、MM可增高五、C反應(yīng)蛋白*原理：與肺炎雙球菌C多糖體反應(yīng)的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白。具有激活補(bǔ)體、促進(jìn)吞噬、免疫調(diào)控的作用。方法：?jiǎn)蜗蛎庖邤U(kuò)散、膠乳法、ELISA法抗CRP與血清中CRP反應(yīng)評(píng)價(jià)：非特異性指標(biāo)，可見于化膿性感染、組織壞死、腫瘤、風(fēng)濕活動(dòng)等。六、嗜異凝集反應(yīng)*原理：IgM嗜異性抗體凝集異種動(dòng)物紅細(xì)胞評(píng)價(jià)

5、：*正常人陰性或凝集價(jià)<1:8*發(fā)病后1周升高，2~3周達(dá)高峰*非特異性：Hodgkin、血清病七、冷凝集素試驗(yàn)原理：肺炎支原體感染后，血清中產(chǎn)生“寒冷紅細(xì)胞”凝集素。自身紅細(xì)胞或“O”型紅細(xì)胞0～4℃凝集，37℃散開。評(píng)價(jià)：*2周后上升，1:32，4周后達(dá)高峰*流感、傳單可呈陽(yáng)性反應(yīng)，但滴度低。八、冷球蛋白檢查原理：草酸鈉抗凝，分離血漿，分別置于4℃、37℃直立72小時(shí),4℃中可見沉淀評(píng)價(jià)：*SLE15％~35％陽(yáng)性提示疾病活動(dòng)*非特異性九、流行性出血熱血清學(xué)檢查原理：感染出血熱病毒肺癌傳代H549細(xì)胞株＋患者血

6、清＋熒光標(biāo)記抗IgG或IgM?細(xì)胞漿中出現(xiàn)黃綠色熒光評(píng)價(jià)：抗IgM標(biāo)記3～6天抗IgG標(biāo)記2周十、梅毒血清學(xué)檢查1.未滅活血清反應(yīng)素試驗(yàn)（unheatedserumreagintest,USR）梅毒螺旋體破壞組織，產(chǎn)生心磷脂，生成反應(yīng)素。牛心磷脂卵磷脂膽固醇血清（反應(yīng)素）顆粒凝集＋2.快速血漿反應(yīng)素試驗(yàn)（rapidplasmareagintest,RPR）原理：RPR卡片（涂有類脂質(zhì)抗原）十一、AIDS的血清學(xué)檢驗(yàn)1.間接免疫熒光法原理：檢測(cè)HIV抗體感染HIV的淋巴細(xì)胞＋血清＋熒光染色2.病毒檢查法原理：分離感染

7、淋巴細(xì)胞?培養(yǎng)?上清液逆轉(zhuǎn)錄酶十二、肝炎病毒的檢測(cè)甲肝病毒：RNA病毒HAV－Ag發(fā)病前二周即可從糞中檢出，兩周后消失HAV－RNA：對(duì)早期診斷具有特異性HAV-IgM：病毒衣蛋白抗體發(fā)病2周100%陽(yáng)性，一年消失。對(duì)于急性期患者診斷有益十二、肝炎病毒的檢測(cè)HAV-IgA：腸道粘膜分泌，糞中檢出。早期診斷指標(biāo)之一。HAV-IgG：病愈后可長(zhǎng)期存在。感染過(guò)用于流行病學(xué)調(diào)查十二、肝炎病毒的檢測(cè)乙肝病毒：DNA病毒HBsAg：外殼蛋白，本身無(wú)傳染性，但常與DNA共存。潛伏期，發(fā)病時(shí)達(dá)高峰，3月不轉(zhuǎn)陰有慢性傾向。病毒攜帶者

8、抗HBs：保護(hù)性抗體，發(fā)病后3-6月出現(xiàn)。也可見于疫苗注射后，注射抗HBs免疫球蛋白后十二、肝炎病毒的檢測(cè)乙肝病毒：DNA病毒HBeAg：病毒核心顆粒中的可溶性蛋白。肝炎活動(dòng)期，并有較強(qiáng)傳染性。可垂直傳播（90%）持續(xù)陽(yáng)性：慢性化、肝硬化抗HBe：急性期出現(xiàn)，易進(jìn)展為慢性慢活肝出現(xiàn)，易進(jìn)展為肝硬化抗體、抗原同時(shí)存在，ALT升高－可進(jìn)展為原發(fā)性肝癌還提示：復(fù)制