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1、免疫學檢查(Immunologictest)陜西中醫(yī)學院診斷學教研室一、檢查內容1.評估機體的免疫功能狀態(tài)2.檢測與自身免疫病相關的抗體或致敏T細胞3.檢測與過敏性疾病相關的變應原或IgE抗體4.檢測某些致病微生物的抗原或抗體5.檢測某些腫瘤抗原、激素含量二、常用的免疫檢查方法1.沉淀試驗2.凝集試驗3.補體結合試驗4.中和試驗5.熒光免疫技術6.酶免疫技術7.放射免疫技術8.發(fā)光免疫技術9.時間分辨熒光免疫技術10.流式細胞儀分析技術11.分子生物學分析技術三、機體免疫功能檢查(一)非特異性免疫功能測定1
2、.血清蛋白區(qū)帶電泳-+白蛋白α1、α2球蛋白β1、β2球蛋白γ-球蛋白血清蛋白區(qū)帶電泳示意圖譜2.外周血中性粒細胞計數(shù)，趨化、吞噬、殺菌功能測定①趨化功能降低：易反復感染、齒齦炎、中耳炎、Chediak-Higashi綜合征、遲鈍性白細胞綜合征、有肌蛋白功能不全、高于IgE綜合征等。 ②吞噬功能降低：中性粒功能異常綜合征、補體所致調理缺陷癥、膜糖蛋白缺陷癥、慢性肉芽腫、肌動蛋白功能不全等。 ③殺菌功能降低：慢性肉芽腫、多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、慢性粒白血病、糖尿病等三、機體免疫功能檢查3.血清總補體、C3
3、、C4、B因子、溶菌酶測定①補體降低：自身免疫病，易反復感染等②補體增高：風濕熱急性期、結節(jié)性多動脈炎、皮肌炎、心梗、Reiter綜合征等③B因子降低：表示補體旁路途徑激活④溶菌酶：↑見于白血病、腎臟疾?。弧娪谀[瘤患者三、機體免疫功能檢查2.B淋巴細胞功能檢查①血清IgG含量測定②特異性抗體產(chǎn)生能力的體內試驗白喉類毒素、破傷風類毒素、肺炎球菌多糖抗原、流感嗜血桿菌多糖抗原接種后5~7天能檢測到IgM型抗體，再次免疫后1周產(chǎn)生IgG型抗體。③特異性抗體產(chǎn)生能力的體外試驗洗滌++→低倍鏡下計數(shù)酶點數(shù)(抗體生成
4、細胞數(shù))Ag吸附醋纖膜外周血單個核細胞5%CO237℃×6h生物素溫育抗體洗滌酶復合物底物三、機體免疫功能檢查3.淋巴結或組織活檢淺皮質區(qū)——B細胞的居住地深皮質區(qū)——T細胞的居住地髓質——漿細胞(受抗原刺激)/髓索及髓竇(靜止淋巴結)直腸粘膜固有層有豐富的漿細胞和IgA抗體分泌細胞常見與體液免疫功能缺陷的疾病1.性聯(lián)無丙種球蛋白血癥2.普通變異型免疫缺陷病3.高IgM綜合征4.選擇性IgA缺陷病5.IgG亞類缺陷癥三、機體免疫功能檢查(三)細胞免疫功能檢查1.T細胞數(shù)量檢查CD3+成熟T細胞(69.4±4
5、.86%)CD4+輔助T細胞、誘導T細胞、殺傷T細胞、單核吞噬細胞(41.17±5.28%)CD8+抑制T細胞、毒性T細胞、反抑制T細胞(24.58±4.02%)2.T細胞功能檢查①T細胞轉化試驗(60%~80%)②抑制性T細胞功能檢測(40%±10%)③T細胞介導細胞毒試驗三、機體免疫功能檢查3.mIL-2R細胞檢測mIL-2R陽性細胞是T細胞活化的標志(正常人的PBMC靜息狀態(tài)為2%~6%，PHA誘導培養(yǎng)后為22%~39%)靜息時過度表達提示有免疫病理損害誘導后表達率降低提示患者細胞免疫功能不全4.嬰幼
6、兒側位胸片若不見胸腺陰影，提示有T細胞缺陷5.淋巴結活檢若皮質區(qū)和副皮質區(qū)界線不清，生發(fā)中心消失，提示有T細胞缺陷6.成人PPD5u,48~72h后紅腫、硬結或直徑<5mm，提示有細胞免疫功能不全。三、機體免疫功能檢查(三)NK細胞活性檢查C’PDAFDA*+活性降低：腫瘤、白血病、自身免疫病、對病毒、真菌易感活性增高：多發(fā)性骨髓瘤、骨髓移植、EBV、HSV、TB感染的早期，習慣性流產(chǎn)注PDA*：乙酰乙酸羧基熒光素，F(xiàn)DA*：羧基熒光素K562FDA*5%CO237℃×4hNKK562K562FDA*流式細
7、胞儀測定活的K562細胞的熒光來推知NK細胞的活性三、機體免疫功能檢查1.ANAHep-2細胞做抗原片最敏感，熒光圖像最清晰，若結合靈長類動物器官組織冷凍切片做抗原，能檢出更多的自身抗 體。均質型：抗組蛋白抗體，見于所有活動期SLE者周邊型：抗ds-DNA，見于SLE，特別伴腎炎者核仁型：抗核糖體或抗U3RNP，見于SLE、SSc散在斑點型：抗著絲點抗體，見于Crest綜合征斑點型：抗uRNP抗體(核糖核蛋白)，高滴度見于MCTD，SLE、SSc抗SM抗體(U族RNA)，見于30%~40%SLE抗Scl-7
8、0抗體(非組蛋白染色體蛋白)，見于15%~20%SSc抗SSA/Ro抗體(Y1-Y5RNP)，見于SLE、pSS抗SSB/La抗體(RNA聚合酶Ⅲ轉錄物)，見于pss、ssc抗K抗體(非組蛋白酸性核蛋白)，見于SLE、SSc四、自身抗體檢查2.ENA(extractablenuclearantigen)是源于小牛胸腺、豬脾，在鹽水中溶解的一部分核抗原，通過免疫印跡技術將不同分子量的抗原分開，可檢出抗SM、抗uRN
