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《東北刺人參遺傳多樣性的rapd分析》由會員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、萬方數(shù)據(jù)第47卷第6期2008年6月湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)HubeiAgriculturalSciencesVol。47No．6Jun．，2008東北刺人參遺傳多樣陛的RAPD分析高日，廉美蘭，吳松權(quán)，樸炫春(延邊大學(xué)農(nóng)學(xué)院，吉林龍井133400)摘要：應(yīng)用RAPD技術(shù)對7份來源于不同區(qū)域的東北刺人參進(jìn)行了分析，從100條隨機(jī)引物中篩選出16條引物，共擴(kuò)增出117條譜帶，其中51條為多態(tài)帶，多態(tài)性比率為43．62％，其多態(tài)性比率較低。系統(tǒng)聚類分析將7份東北刺人參居群分為2大類群，長白山老嶺山脈的東北刺人參居群聚為一類。長白山主峰南側(cè)的東北刺
2、人參居群聚為一類。東北刺人參總體較低的遺傳多樣性是導(dǎo)致其瀕危的原因之一。關(guān)鍵詞：東北刺人參；聚類分析；RAPD中圖分類號：$567．5+3；Q503文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A文章編號：0439—8114{2008)06—0627也RAPDAnalysisofGeneticDiversityforEndangeredop／panaxelatusGAORi，LIANMei-lan，W1JSong-quan，PIAOXuan—chun(A鰣culturalCollegeofYanbianUniversity，Longjing133400，Jilin
3、，China)Abstract：Inthisstudy，7op加刪elatussampliesfromdifferentregionsofChangbaiMountainwereanalyzedbyusingRAPDtechniques．16polymorphicprimers，screenedoutfrom100randomprimers，wereusedandproduced117repro-duciblebands．Ofthem，51bands(43．62％)werepolymorphic．Byclusteranalysis
4、thegermplasmusedinthisstudywasdi—videdinto2groups：D．ekausofLaolingMountainforonegroup．0．elatusofsouthofChangbaiMountainfortheother．Thelowergeneticdiversitywasoneofthereasonsof0．elatu．endangermem．Keywords：Dp加刪e／atus；clusteranalysis；RAPD東北刺人參(op加觀∞elatusNakai)系五加科刺人參屬多年
5、生落葉灌木，又名北五加、刺人參，其分布Ⅸ域十分狹窄，全世界只在中國、俄羅斯、朝鮮等3國境內(nèi)有少量分布?，在我國主產(chǎn)于吉林省長自山海拔700，1900m的針葉林帶及遼寧東部山區(qū)海拔800～1000m的松杉林下。據(jù)近幾年的調(diào)查，整個長白山區(qū)小片生長的天然東北刺人參已屈指可數(shù)，散生的也已不多陘]，必須采取有效措施予以保護(hù)。幾年來。國內(nèi)對東北刺人參的致瀕因素和保護(hù)對策也進(jìn)行了一些探討舊’4]，但尚未見有關(guān)東北刺人參遺傳多樣性的研究報道。遺傳多樣性的研究不僅有助于了解物種的進(jìn)化歷史和適應(yīng)潛力．以及探討物種瀕危的機(jī)制，同時也關(guān)系到能否采取科學(xué)
6、有效的措施來保護(hù)物種。用于遺傳多樣性分析的方法很多，其中RAPD方法由于具有簡便、靈敏、費(fèi)用相對便宜、而且可以檢測到大量多態(tài)位點(diǎn)等優(yōu)點(diǎn)，已被廣泛地用于研究，并獲得了滿意的結(jié)果。本文利用RAPD分子標(biāo)記法對東北刺人參群體的遺傳多樣性進(jìn)行了分析，旨在揭示東北刺人參植物的瀕危機(jī)制。為更好地保護(hù)東北刺人參種群奠定基礎(chǔ)。1材料與方法1．1材料野外采集供試東北刺人參植株當(dāng)年生嫩葉，每地區(qū)隨機(jī)選取10株東北刺人參的葉片，裝入保鮮袋，封口，置于樣品貯藏箱(由超低溫冰袋維持冷藏條件)中帶回實(shí)驗室，一70℃保存待用。各采樣地概況和采樣數(shù)洋見表1。1．
7、2RAPD分析1．2．1基因組DNA的提取DNA的提取采用CTABt5J法，提取DNA后，應(yīng)用Michemor等的分離群體分組分析法，分別將每個地區(qū)的10株DNA樣收稿Et期；2008-02—20基金項目：國家自然科學(xué)基金項目(30560094)；教育部重點(diǎn)科技項目(205035)作者簡介：高13(1982一)，男，吉林撫松人，2005級碩士研究生，(電話)13944769818；通訊作者，樸炫春，(電話)0433—3261756(電子信箱)nyypxc@ybu．edu．cn。萬方數(shù)據(jù)628湖北農(nóng)業(yè)科學(xué)2008正襲l東北刺人參采樣
8、地及采樣斂品等量混合，組成7個不同地區(qū)的基因池。1．2．2DNA擴(kuò)增反應(yīng)程序反應(yīng)程序設(shè)置為：94℃預(yù)變性5min，940C變性45S．370C退火60s．720C延伸90s，40個循環(huán)。最后72℃延伸7min。反應(yīng)體系為(20¨L)：9．8lxLd
