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1、廣西大學(xué)碩士學(xué)位論文象草遺傳多樣性的RAPD分析姓名：藍(lán)亦鋒申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料科學(xué)指導(dǎo)教師：賴志強(qiáng)20120628象草遺傳多樣性的RAPI)分析摘要以廣西南寧地區(qū)的9種象草的幼嫩葉片為材料，研究了RAPD—PCR反應(yīng)條件；并應(yīng)用RAPD分子標(biāo)記對(duì)9份象草的遺傳多態(tài)性、親緣關(guān)系等進(jìn)行分析，結(jié)果表明：1．RAPD—PCR優(yōu)化的最終體系為：總體積為20此，反應(yīng)體系中含有總體積20皿，反應(yīng)體系中試劑添加量：10xPCRBuffer2．01xl_,、帥s(各10mM)0．4此、primer(10pM)1．2止、M92十(2
2、5mM)1．5止、TaqE(SWIJLL)0．4皿、DNA(10ng)2．O止、ddH20upto20止。2．篩選出12條RAPD引物進(jìn)行RAPD分析。12條RAPD引物共檢測(cè)到51個(gè)位點(diǎn)，其中多態(tài)位點(diǎn)占100％，Nei’s基因多樣度為0．3108，Shannon信息指數(shù)為0．4781；砒姬D標(biāo)記顯示象草具有豐富的遺傳多態(tài)性。3．基于RAPD擴(kuò)增構(gòu)建相應(yīng)的Nei’s遺傳距離矩陣，以及UPGMA樹(shù)圖。4．根據(jù)電泳結(jié)果記錄清晰可重復(fù)的RAPD條帶。當(dāng)用同一引物對(duì)9種象草DNA進(jìn)行電泳時(shí)，同一遷移率的條帶記為一個(gè)位點(diǎn)，擴(kuò)增帶存在時(shí)記為1，
3、否則記為O，用NTSYS軟件進(jìn)行運(yùn)算并作圖。通過(guò)聚類分析得出，9種象草可明顯分為兩大類。由于這9種象草可明顯分為親緣關(guān)系較遠(yuǎn)的兩大類，進(jìn)行象草雜交育種時(shí)可以嘗試分別采用兩大類象草中的一種作為親本材料，雜交得出的后代可能會(huì)有比較優(yōu)異的生產(chǎn)性狀和表型性狀，從而為象草的雜交育種提供科學(xué)依據(jù)和理論依據(jù)。關(guān)鍵詞：象草隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA簡(jiǎn)單序列重復(fù)標(biāo)記條件優(yōu)化遺傳多樣性STUDYoNGENETICDIVERSITYOF尸E7V=；啦丁U^夕SSP．BYRAPDMARKERABSTRACT9Pennisetumssp．materialsfrom
4、GuangxiNanningwerestudiedforoptimizingtheRAPDreactionconditionsandprocedure．Penffisetum’SgeneticdiversityandrelationshipwerestudiedbyRAPDmarkers．Themajorresultsshowed嬲f(shuō)ollows：1．TheobtainedoptimumschemewasfoundonreactionsystemforRAPD—PCR：10xPCRBuffer2．0I-tL、dNTPs(eachlO
5、mM)O．4肛L、primer(10pM)1．2止。、M92+(25mM)1．5此、TaqE(5U／此)0．4此、DNA(10ng)2．0此、ddH20upto20}此．2．TheanalysisofRAPDmarkershowedthat12RAPDprimersamplifiedatotalof51seorablemarkers，percentageofpolymorphiclociWas100％，Nei’sgeneticdiversityandshannon’Sinformationindexwere0．3108and0．47
6、81．TheresultsofRAPDsilowedthatthegeneticdiversityofforageresourcesonpennisetumWasrich．3．ThematrixesofgeneticdistanceandUPGMAclusterwereestablishedonRAPDfingerprint．4．TheclearandreproducibleRAPDbandswererecordedaccordingtotheelectrophoresisresults．Intheamplificationprod
7、uctsbythesameprimer,bandswiththesamemobilitywererecordedtoalocus,"l’'Wasrecordedwhenthebandexisted．Otherwise,"0’'WaSrecorded．NTSYSsoftwareWasusedforcalculationandmappingaccordingtothedata．Byclusteringanalysis，9kindsofPennisetumssp．canbeclearlydividedinto2categories．Bec
8、ausethese9kindsofPennisetumssp．canbeclearlydividedintotwodistantcategories，wecantrytousetwoPennisetumssp．fromdifferen
