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1、第二十三章：需氧革蘭陽性桿菌及檢驗(yàn)檢驗(yàn)系劉濤棒狀桿菌屬第一節(jié)*G＋菌，菌體一端或兩端彭大呈棒狀而得名*菌體染色不均勻，出現(xiàn)節(jié)段濃染或異染顆粒*排列不規(guī)則，呈柵欄狀，或L形，或V形*無莢膜、無鞭毛、不產(chǎn)生芽胞*多為條件致病菌，只有白喉棒狀桿菌是致病菌白喉棒狀桿菌CASE患兒，男，6歲，咽痛、聲嘶、咳嗽、發(fā)熱3天；體溫37℃，心率96/分，白細(xì)胞升高；亞碲酸鉀培養(yǎng)+++病史：百白破疫苗出生后三個(gè)月打了第一針，加強(qiáng)免疫因經(jīng)濟(jì)困難而未接種（家屬說舍不得花錢，一針要40多元；孩子的父親右手殘疾）問題：什么?。炕颊吆兔芮?/p>
2、接觸者需如何處理？*白喉（Diphtheria）是一種急性呼吸道傳染病特征：患者咽喉部出現(xiàn)灰白色的假膜假膜一、生物學(xué)性狀1.白喉棒狀桿菌的形態(tài)學(xué)特征細(xì)長桿菌，粗細(xì)不一，一端或兩端膨大呈棒狀，排列不規(guī)則，呈柵欄狀、V字形或L形。奈瑟染色革蘭染色1.白喉棒狀桿菌的形態(tài)學(xué)特征異染顆粒成分：核糖核酸+多磷酸鹽作用：儲(chǔ)存養(yǎng)料、鑒定價(jià)值A(chǔ)lbert染色2.培養(yǎng)特性*呂氏血清斜面培養(yǎng)物含凝固的血清，生長迅速，異染顆粒明顯。*亞碲酸鉀血平板黑色菌落。還原在亞碲酸鉀血瓊脂平板上的白喉棒狀桿菌菌落（18～24h）亞碲酸鹽碲（黑色
3、）根據(jù)對(duì)亞碲酸鉀的還原能力、菌落形態(tài)及生化反應(yīng)可將白喉棒狀桿菌分為3種類型：重型（gravis）、輕型（mitis）和中間型（intermedius）。重型輕型菌落不溶血、不規(guī)則、有條紋菌落β溶血、光澤、凸起3.變異*白喉棒狀桿菌形態(tài)、菌落和毒性均可發(fā)生變異。*無毒株溶原性細(xì)菌（產(chǎn)生外毒素）噬菌體4.抵抗力*抗寒冷和干燥*對(duì)濕熱抵抗力弱*對(duì)青霉素、氯霉素、紅霉素敏感對(duì)磺胺不敏感二、致病性與免疫性1.致病物質(zhì)：*白喉毒素（diphtherotoxin）*索狀因子（cordfactor）*K抗原（Kantigen
4、）2.致病機(jī)制1）白喉外毒素：只有攜帶β棒狀桿菌噬菌體的溶原性白喉?xiàng)U菌才能產(chǎn)生外毒素外毒素結(jié)構(gòu)：B亞單位：有結(jié)合和轉(zhuǎn)位功能A亞單位：其上有1個(gè)催化區(qū)作用靶位：心肌和神經(jīng)細(xì)胞2.致病機(jī)制2）索狀因子破壞哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的線粒體，影響細(xì)胞呼吸與磷酸化。3）K抗原：抗吞噬3.所致疾?。?傳染源：患者、恢復(fù)期帶菌者、健康帶菌者*傳播途徑：飛沫或污染（多在秋冬季）*臨床表現(xiàn)：白喉——急性呼吸道傳染病*臨床表現(xiàn)：1）細(xì)菌與毒素共同作用引起局部癥狀：炎癥，壞死，纖維蛋白滲出，假膜導(dǎo)致窒息2）毒素入血引起全身中毒癥狀：外周神經(jīng)
5、炎：膈肌麻痹—呼吸困難—聲帶麻痹—聲音嘶啞—軟頜麻痹—吞咽困難心肌炎3.所致疾?。?）人群易感性*普遍易感；*1~5歲兒童；*成人也有可能。4.免疫性2）免疫特點(diǎn)*抗毒素免疫；*感染后機(jī)體可獲得牢固的免疫力；*機(jī)體還可通過其它方式獲得免疫力：六月以下嬰兒----母親成人----隱性感染、疫苗三、微生物學(xué)檢查法*標(biāo)本：假膜邊緣取材*涂片鏡檢：革蘭染色菌體顏色奈瑟染色典型菌體排列Albert染色異染顆粒標(biāo)本片鏡下特點(diǎn)*分離培養(yǎng)：標(biāo)本接種呂氏血清斜面37℃6~12h直接涂片鏡檢接種亞碲酸鉀瓊脂平板培養(yǎng)黑色菌落12~
6、18h灰白色小菌落（快速診斷）Elek平板試驗(yàn)白喉?xiàng)U菌的有毒菌株可產(chǎn)生白喉外毒素，白喉抗毒素可與其特異性結(jié)合，中和白喉外毒素的毒性，可用細(xì)菌培養(yǎng)法和動(dòng)物試驗(yàn)予以證實(shí)。【原理】Elek平板毒力試驗(yàn)是一種體外的毒力測(cè)定方法。通過觀察白喉抗毒素與白喉外毒素的雙向瓊脂擴(kuò)散現(xiàn)象，判斷所培養(yǎng)的白喉?xiàng)U菌的產(chǎn)毒性?！静牧稀?．產(chǎn)毒素的白喉?xiàng)U菌、類白喉?xiàng)U菌及待測(cè)的白喉?xiàng)U菌呂氏血清斜面24h培養(yǎng)物。2．Elek瓊脂蛋白胨培養(yǎng)基。3．白喉抗毒素(1000u/m1)、馬或兔血清(無菌)、無菌濾紙條(6.0×1.5cm)、無菌5ml刻
7、度吸管、無菌平皿及鑷子等。【方法】1．將Elek瓊脂蛋白胨培養(yǎng)基10ml加熱融化，待冷至50～55℃時(shí)，加入無菌的馬或兔血清2ml，立刻混勻，并傾注平板。2．趁瓊脂未凝固前，用無菌鑷子將浸有白喉抗毒素(1000u/m1)的濾紙條(盡量使濾紙條上的抗毒素流盡)貼于平板中央，待瓊脂凝固后將平板置37℃溫箱內(nèi)1～2h(平板面朝下)，使培養(yǎng)基略干燥。3．接種細(xì)菌，以接種環(huán)取產(chǎn)毒素白喉?xiàng)U菌、類白喉?xiàng)U菌和待檢的白喉?xiàng)U菌分別以與濾紙條成垂直的方向劃線接種，接種線須密且集中，接種的菌量宜多。若用此法測(cè)未知標(biāo)本需設(shè)陽性對(duì)照(產(chǎn)
8、毒株)及陰性對(duì)照(無毒株)，一般每個(gè)平板可接種5～6個(gè)標(biāo)本。置37℃培養(yǎng)24、48、72h觀察結(jié)果。【結(jié)果】注意觀察在接種線兩側(cè)距濾紙條約1cm處有無與接種線呈45°角的白色沉淀線出現(xiàn)。有沉淀者，白喉?xiàng)U菌毒力試驗(yàn)陽性，該菌株產(chǎn)生白喉外毒素；無沉淀線者，白喉?xiàng)U菌毒力試驗(yàn)陰性，該菌株不產(chǎn)生白喉外毒素。*毒力鑒定：動(dòng)物試驗(yàn)，Elek平板毒力實(shí)驗(yàn)白喉?xiàng)U菌菌苔沉淀線(陽性)含白喉抗毒素濾紙片Elek毒力實(shí)驗(yàn)結(jié)
