抗人球蛋白試驗陽性及其臨床意義的探討.pdf

抗人球蛋白試驗陽性及其臨床意義的探討.pdf

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1、ISSN1007—8738細胞與分子免疫學雜志(ChinJCellMollmmuno1)2011,27(111245·論著·文章編號:1007—8738(2011)11—1245一O2抗人球蛋白試驗陽性及其臨床意義的探討張勇萍,楊世明,曹麗妍,蘇小花,安寧(第四軍醫(yī)大學唐都醫(yī)院輸血科,陜西西安710038;。陜西省人民醫(yī)院中心實驗室,陜西西安710068)[摘要]目的:觀察抗人球蛋白試驗(AGT)的臨床應(yīng)用及對凝膠卡、專用離心機、孵育器及其配套設(shè)備由瑞士達亞美公自身免疫性溶血性貧血(AIHA)的診斷價值。方法:采用微柱司提供。凝膠法和傳統(tǒng)試管法,對368例臨床表現(xiàn)

2、疑似為AIHA、風濕1.2檢測對象臨床表現(xiàn)疑似為AIHA、風濕免疫性疾病及免疫性疾病及新生兒溶血病患者的血標本進行AGT。結(jié)果:新生兒溶血病患者的血標本368例,病種有血液系統(tǒng)疾病、在368例患者血標本中AGT陽性209例(56.8%),其中直接肝臟疾病、風濕免疫類疾病及感染性疾病等?;颊呔胁煌谷饲虻鞍自囼?DAT)陽性187例(89.5%),間接抗人球蛋白試程度的黃疸、肝脾腫大等貧血癥狀。驗(IAT)陽性12例(6.4%,DAT和IAT均陽性10例(5.3%)。1.3方法AGT陽性的類型分布為IgG+c3型118例(63.1%),IgG型1.3.1DAT試驗

3、采集患者EDTAK2抗凝血5mL及不抗凝45例(24.1%),c3型24例(12.8%)。12例IAT陽性經(jīng)抗體血5mL,離心分離血漿與血清,將紅細胞用生理鹽水洗滌3特異性鑒定為抗D2例(16.7%),抗E5例(41.7%),抗C1次,配成5%的紅細胞懸液。試管法:取試管4支,分別標記例(8.3%),抗Ec2例(16.7%),抗e3例(25.0%)。10例被檢、陰性、陽性及自身對照,在各管中加入相應(yīng)的反應(yīng)物,DAT和IAT均陽性者為新生兒溶血病引起的免疫性抗體。混勻后置37℃孵育5min,取出后以3000r/min離心15S,結(jié)論:AGT能較敏感地檢出吸附在紅細胞

4、膜上的IgG和補體然后用肉眼或顯微鏡觀察結(jié)果。微柱凝膠法:將0.8%的紅c3等免疫性抗體,對AIHA的診斷有重要臨床意義。但AGT細胞懸液50加入LISSCoombs凝膠卡中,1030r/min,離存在一定的假陽性和假陰性,應(yīng)同時做陰陽性對照才能確保,E,IOmin,觀察結(jié)果。與多特異性抗人球蛋白試劑呈陽性反試驗結(jié)果的準確性。應(yīng)的血標本,再分別用抗IgG和抗c3試劑進行分型試驗。[關(guān)鍵詞]自身免疫性溶血性貧血;抗人球蛋白試驗;抗體1.3.2IAT檢測對DAT陰性或陽性患者的血標本再進行鑒定IAT檢測,將2滴被檢者血清加入試管中,加1滴5%的試劑[中圖分類號]R45

5、7.1[文獻標識碼]B紅細胞懸液,混勻置37℃孵育30min,試管法用生理鹽水洗滌3次,加入2滴抗人球蛋白血清,混勻后置37~C5min,取抗人球蛋白試驗(antiglobulintest,AGT)也稱出1000r/min離心1min,然后用肉眼或顯微鏡觀察結(jié)果。Coombs試驗,是臨床上進行血型血清學檢測的經(jīng)典微柱凝膠法:將被檢血清50加入微柱凝膠卡中,再加0.8%方法。AGT分為直接抗人球蛋白試驗(directanti—的試劑紅細胞懸液50,在37'E孵育15min,專用離心機1030globulintest,DAT)和間接抗人球蛋白試驗(indirectr/

6、rain離心10min,觀察結(jié)果。被檢者陽性的血標本再用譜細antiglobulintest,IAT)。我們采用微柱凝膠法和傳統(tǒng)胞進行抗體特異性鑒定及其效價測定。1.3.3DAT與IAT的結(jié)果判斷陰性對照管不凝集,陽性對試管法AGT,對368例臨床表現(xiàn)疑似為自身免疫性照管凝集,則被檢管出現(xiàn)凝集者為陽性;被檢管不凝集者為溶血性貧血(autoimmunehemolyticanaemia,AIHA)、陰性。微柱凝膠法加入反應(yīng)物經(jīng)離心后,紅細胞聚集在凝膠風濕免疫性疾病及新生兒溶血病等患者的血標本進卡的上端者為陽性,在凝膠卡的下端者為陰性。行對比檢測,并對檢測結(jié)果及其影響因

7、素進行了分析。2結(jié)果2.1AGT的陽性率在368例患者血標本中AGT陽性2091材料和方法例(56.8%),其中DAT陽性187例(89.5%),IAT陽性12例1.1試劑與儀器多特異性抗人球蛋白試劑(含抗IgG和(5.7%),DAT和IAT均陽性10例(4.8%)。DAT陽性的類C3)、單特異性抗人球蛋白試劑(分別含抗IgG,抗c3)、抗型分布為IgG+c3型118例(63.1%),IgG型45例D、抗E、抗C、ABO血型反定型細胞、抗體篩查細胞及抗體(24.1%),C3型24例(12.8%)。鑒定譜細胞均由上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司提供。微柱2.2IAT陽性

8、的特異性1

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