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第七章細(xì)菌感染的檢查方法與防治原則
1一、細(xì)菌感染的診斷標(biāo)本的采集和處理原則細(xì)菌的形態(tài)學(xué)檢查細(xì)菌的分離培養(yǎng)和生化鑒定細(xì)菌的非培養(yǎng)檢測方法檢測方法
2病原菌的檢驗程序藥物敏感試驗標(biāo)本直接涂片檢查分離培養(yǎng)生化試驗血清學(xué)試驗動物試驗初步診斷分子生物學(xué)技術(shù)其他檢測技術(shù)明確診斷
31、標(biāo)本的采集和處理原則標(biāo)本采集的一般原則標(biāo)本的處理When?What?How?何時取,取什么,怎么???如何保持細(xì)菌的活性
4When?盡早采集:在發(fā)病的早期或急性期采集標(biāo)本最好在抗生素使用前(如使用過抗生素應(yīng)在申請單上注明)。選擇不同采集時機和標(biāo)本種類:不同病程致病菌在體內(nèi)分布和排出部位不同。
5What?根據(jù)病史與臨床表現(xiàn)確定標(biāo)本采集的類型與部位,盡量采集病變明顯部位標(biāo)本。食物中毒:可疑食物,嘔吐物,糞便痢疾:膿血便敗血癥:血化膿感染的病灶
6How?無菌采集。無菌標(biāo)本:腦脊液、血液、穿刺液等。有菌標(biāo)本:無菌容器根據(jù)目的菌的特性,采用不同的方法采集,以保證目的菌的活性。(需氧菌、厭氧菌、兼性厭氧菌、L型細(xì)菌)安全采集污染:環(huán)境,正常菌群
7上呼吸道標(biāo)本采集標(biāo)本:鼻拭子、咽拭子上呼吸道存在正常菌群,在采集標(biāo)本與結(jié)果分析時應(yīng)予考慮。直接涂片檢查;分離培養(yǎng)。
8標(biāo)本:痰液、支氣管灌洗液等。采集時間:晨痰,且在取痰前用清水反復(fù)漱口。方法:(1)自然咳痰法:(2)氣管鏡下采集法;(3)氣管穿刺法。下呼吸道標(biāo)本采集直接涂片檢查;分離培養(yǎng)。
91.對環(huán)境敏感的細(xì)菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血桿菌等應(yīng)保溫并立即送檢。2.其他所有的標(biāo)本采集后最好在2h之內(nèi)送檢。3.用于細(xì)菌培養(yǎng)的標(biāo)本保存時間不應(yīng)超過24h。4.若不能及時送檢,標(biāo)本應(yīng)置于4℃保存。5.送檢過程中要采取適當(dāng)?shù)谋4娣绞?,注意防護(hù)。標(biāo)本的處理時間?保存?保持細(xì)菌的活性
101.早期采集,不同病程不同標(biāo)本。2.無菌采集3.采集病變明顯部位的新鮮標(biāo)本。4.根據(jù)目的菌的特性用不同的方法采集5.采集適量標(biāo)本。6.安全采集。7.及時送檢,注意保溫。標(biāo)本采集和處理的一般原則安全、有效地采集到可能存在的病原菌,并保持其活性。
112、細(xì)菌形態(tài)學(xué)檢查觀察細(xì)菌形態(tài)、排列、結(jié)構(gòu)和染色性。有助于對病原菌的初步識別,對臨床早期診斷和治療有一定的參考意義。了解有無細(xì)菌及大致的菌量。
12形態(tài)學(xué)檢查方法不染色法:懸滴法壓片法染色法:革蘭染色法,抗酸染色法。
13細(xì)菌不經(jīng)染色直接鏡檢,主要用于檢查生活狀態(tài)下細(xì)菌的動力及運動狀況。初步鑒定細(xì)菌。常用的方法:壓滴法和懸滴法。不染色標(biāo)本
14單染色法:只能觀察微生物的大小、形狀和細(xì)胞排列狀況,但不能鑒別微生物以及其特殊構(gòu)造等。復(fù)染色法:用兩種或兩種以上染色液進(jìn)行染色,有協(xié)助鑒別微生物的作用,故也稱鑒別染色法。常用的有:革蘭氏染色法、抗酸染色法、熒光染色等。常用的染色方法
151.革蘭染色(gramstain)G+球菌G-桿菌丹麥C.Gram于1884年創(chuàng)建,用于細(xì)菌分類學(xué)研究
16革蘭染色的意義初步識別和鑒定細(xì)菌。為抗菌藥物的選擇提供參考。了解病原菌的致病性。
173、細(xì)菌的分離培養(yǎng)和鑒定培養(yǎng)基的種類和選擇細(xì)菌分離及培養(yǎng)的方法細(xì)菌生化反應(yīng)和鑒定
184、細(xì)菌的非培養(yǎng)檢測方法免疫學(xué)檢測分子生物學(xué)檢測細(xì)菌毒素的檢測動物實驗
19免疫學(xué)檢測基本原理依據(jù)抗原抗體特異性結(jié)合的原理,用已知的抗原檢測未知的抗體或用已知的抗體,檢測未知的抗原。細(xì)菌抗原的檢測體內(nèi)抗體的檢測快速,簡單、敏感,特異性強。
20二、細(xì)菌感染的特異性預(yù)防
21獲得性免疫產(chǎn)生的方式主動免疫自然免疫患病、隱性感染人工免疫疫苗、類毒素被動免疫自然免疫胎盤、初乳人工免疫抗毒素、丙球
22人工免疫采用人工方法將疫苗、類毒素等或含有某種特異性抗體、細(xì)胞免疫制劑等接種于人體,以增強宿主的抗病能力。生物制品:人工免疫的免疫原、免疫血清、細(xì)胞制劑及診斷制劑的生物性制劑。
23將疫苗或類毒素接種于人體,使機體產(chǎn)生獲得性免疫力的一種防治微生物感染的措施。作用:特異性預(yù)防,人工主動免疫artificialactiveimmunity
24用于人工主動免疫的生物制品死疫苗活疫苗類毒素亞單位疫苗核酸疫苗
25區(qū)別點死疫苗活疫苗制劑特點死,強毒株活減毒株接種劑量與特點量較大,2~3次量較小,1次保存及有效期易保存,約1年不易保存免疫效果較低,維持?jǐn)?shù)月~2年較高,維持3~5年甚至更長死疫苗與活疫苗的比較
26人工被動免疫artificialpassiveimmunity注射含有特異性抗體的免疫血清或純化免疫球蛋白抗體,或細(xì)胞因子等免疫制劑,使機體即刻獲得特異性免疫。作用:治療,緊急預(yù)防
27抗毒素用于人工被動免疫的生物制品丙種球蛋白(麻疹、甲肝、脊髓灰質(zhì)炎)
28區(qū)別要點人工主動免疫人工被動免疫免疫物質(zhì)抗原抗體或細(xì)胞因子等免疫出現(xiàn)時間慢,2~4周快,立即免疫維持時間長,數(shù)年~數(shù)月短,2~3周主要用途預(yù)防治療或緊急預(yù)防人工主動免疫與人工被動免疫的比較
29小結(jié)細(xì)菌的致病機制細(xì)菌的致病的物質(zhì)基礎(chǔ)宿主的免疫防御機制(詳見免疫學(xué))感染的類型醫(yī)院感染細(xì)菌感染的診斷標(biāo)本的采集和處理原則人工免疫的方法和特點
30思考題細(xì)菌致病的相關(guān)因素和物質(zhì)基礎(chǔ)試比較內(nèi)毒素與外毒素的區(qū)別?機體抗菌免疫的特點何謂帶菌者致病菌引起全身感染的類型標(biāo)本的采集和處理原則人工免疫的方法和特點
31謝謝!謝謝!