脂肪源性干細胞體外成骨特性的研究

脂肪源性干細胞體外成骨特性的研究

ID:9644192

大小:58.50 KB

頁數(shù):5頁

時間:2018-05-04

脂肪源性干細胞體外成骨特性的研究_第1頁
脂肪源性干細胞體外成骨特性的研究_第2頁
脂肪源性干細胞體外成骨特性的研究_第3頁
脂肪源性干細胞體外成骨特性的研究_第4頁
脂肪源性干細胞體外成骨特性的研究_第5頁
資源描述:

《脂肪源性干細胞體外成骨特性的研究》由會員上傳分享,免費在線閱讀,更多相關內(nèi)容在應用文檔-天天文庫。

1、脂肪源性干細胞體外成骨特性的研究作者:李俊剛,王萬明,孫效棠【摘要】  目的探討兔脂肪源性干細胞體外成骨分化能力。方法取3個月齡新西蘭白兔頸背部皮下脂肪組織,Ⅰ型膠原酶消化獲得細胞。繪制細胞生長曲線,采用免疫細胞熒光法檢測細胞表面抗原CD44、CD45;分別加入條件培養(yǎng)液對所獲得細胞進行成骨成脂誘導,并分別進行形態(tài)學、堿性磷酸酶、鈣鹽沉積和油紅O染色相關檢測;將脂肪源性干細胞分為成骨誘導組和非成骨誘導組,分別于誘導后1、2、3、4周檢測兩組的堿性磷酸酶和鈣離子濃度并作統(tǒng)計分析。結果a)所獲細胞CD44陽性表達,CD45陰性表達;所繪制的生

2、長曲線成典型的“S”型。b)在誘導條件下,堿性磷酸酶及鈣鹽沉積均呈陽性表達,油紅O染色為陽性。c)堿性磷酸酶濃度在誘導組與非誘導組之間存在組間差別,在各個時間點誘導組堿性磷酸酶濃度均高于非誘導組(P<0.05,n=5);誘導組堿性磷酸酶濃度在不同誘導時相其濃度變化趨勢不同(P<0.05,n=5);鈣離子濃度在誘導組與非誘導組之間存在組間差別,在各個時間點誘導組鈣離子濃度高于非誘導組(P<0.05,n=5)。誘導組鈣離子濃度在不同誘導時相其濃度變化的趨勢不同(P<0.05,n=5)。結論脂肪干細胞的易分離培養(yǎng)、增殖快和良好的成骨誘導活性完全

3、符合對種子細胞的要求,是一種理想的骨組織工程種子細胞?!娟P鍵詞】脂肪源性干細胞;成骨分化;堿性磷酸酶;鈣離子  Abstract:ObjectiveToexplorethedifferentiationofadiposederivedstemcells(ADSCs)fromrabbitsintoosteogeniccellsinvitro.MethodsInthisstudy,ADSCsthenapeofNemunofluorescenceandcellauxodromeedosteogenicandadipogenicdifferen

4、tiationrespectively,folloorphology,alkalinephosphataseassay,VonKossaandrathonumredOstain.ADSCsconcentrationofthesetthecheckesredOstainofADSCsediums.c)Alkalinephosphataseassays(ALP)e(P<0.05,n=5)andALPoftheinducedgroupconcentrationconcentrationofinducedgroupse(P<0.05,n=5)

5、andcalciumconcentrationoftheinducedgroupakesADSCsidealseedcellsofbonetissueengineering.  Keycells;osteogenicdifferentiation;alkalinephosphataseassay;calciumion  脂肪源性干細胞(adiposederivedstemcells,ADSCs)是近年來從脂肪組織中分離得到的一種具有多向分化潛能的干細胞。研究發(fā)現(xiàn)這些細胞能夠在體外穩(wěn)定增殖且衰亡率低,同時它具有來源豐富、基金項目:南京軍區(qū)

6、醫(yī)學科學技術研究“十一五”計劃資助項目(06MA137)取材容易、少量組織即可獲取大量干細胞、低免疫源性、不涉及道德倫理問題等優(yōu)點,此外,已證實其具有向成骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞、肌肉細胞、心肌細胞、神經(jīng)細胞和內(nèi)皮細胞等方向分化的能力[1,2]。因此,ADSCs是一種很有前景的組織工程種子細胞,具有非常重要的研究價值。本實驗通過研究兔脂肪干細胞的分離、培養(yǎng)、鑒定以及體外成骨、成脂誘導分化過程,為其能夠作為骨組織工程理想的種子細胞提供實驗基礎?! ?資料與方法  1.1材料  3個月齡新西蘭白兔(福州總院實驗動物中心),低糖、高糖Dulb

7、eco改良的MEM培養(yǎng)液(dulbeco′smodifildeaglemedium,DMEM)(Gibco公司),Ⅰ型膠原酶、胰蛋白酶、地塞米松、L抗壞血酸、β甘油磷酸鈉、胰島素、3異丁基1甲基黃嘌呤(3isobutyl1methylxanthine,IBMX)、吲哚美辛、二甲基亞砜(DMSO)、噻唑藍(Sigma公司)、標準胎牛血清(杭州四季青),CD44、CD45抗體、正常山羊血清(武漢博士德),F(xiàn)ITC標記羊抗小鼠IgG(北京中杉金橋),堿性磷酸酶染色試劑盒、堿性磷酸酶檢測試劑盒、鈣離子檢測試劑盒(南京建成生物制品有

8、限公司),培養(yǎng)瓶、6孔、12孔及96孔板(Costar公司)?! ?.2方法  1.2.1ADSCs的原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)  取3個月齡新西蘭白兔,雌雄不限,速眠新0.2~0.3mL/kg肌注麻

當前文檔最多預覽五頁,下載文檔查看全文

此文檔下載收益歸作者所有

當前文檔最多預覽五頁,下載文檔查看全文
溫馨提示:
1. 部分包含數(shù)學公式或PPT動畫的文件,查看預覽時可能會顯示錯亂或異常,文件下載后無此問題,請放心下載。
2. 本文檔由用戶上傳,版權歸屬用戶,天天文庫負責整理代發(fā)布。如果您對本文檔版權有爭議請及時聯(lián)系客服。
3. 下載前請仔細閱讀文檔內(nèi)容,確認文檔內(nèi)容符合您的需求后進行下載,若出現(xiàn)內(nèi)容與標題不符可向本站投訴處理。
4. 下載文檔時可能由于網(wǎng)絡波動等原因無法下載或下載錯誤,付費完成后未能成功下載的用戶請聯(lián)系客服處理。