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《植物源農(nóng)藥殺蟲與抑制幾丁質(zhì)酶活性的測定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、植物源農(nóng)藥殺蟲與抑制幾丁質(zhì)酶活性的測定作者：周桂孫果宋，黃科林，林潤國，張桂華，鄧光輝【摘要】目的研究青蒿葉、桉樹葉、紅樹植物白骨壤葉乙醇提取物對大蠟螟蟲的毒殺作用以及對蟲體幾丁質(zhì)酶活性的抑制作用。方法采用室內(nèi)藥液噴蟲法測定3種植物乙醇提取物的殺蟲活性與抑制幾丁質(zhì)酶活性。結(jié)果青蒿、桉樹、紅樹植物白骨壤葉乙醇提取物對大蠟螟24h的校正死亡率分別為(69.00±3.87)%，(53.47±11.63)%，(18.60±6.70)%。對大蠟螟幾丁質(zhì)酶的抑制率分別為(20.33±1.42)%，(20.59±1.72)%，(13.56±1.58)
2、%。結(jié)論青蒿葉與桉樹葉植物乙醇提取物的殺蟲活性與抑制幾丁質(zhì)酶活性顯著高于紅樹植物白骨壤葉乙醇提取物(P<0.05)。【關(guān)鍵詞】植物源農(nóng)藥;大蠟螟;殺蟲活性;幾丁質(zhì)酶 Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofsouthernangroveavicenniamarinaleavesethanolextractsontheinsecticidalactivityandchitinaseinhibitoryactivityagainstGalleriamellonella.MethodsTheinsec
3、ticidalactivityandchitinaseinhibitoryactivityofthethreeplantethanolextractsethod.ResultsTheresultsshoent,thecorrecteddeathratiosofsouthernangroveavicenniamarinaleavesethanolextractangroveavicenniamarinaleavesethanolextractmarkedly. Keyellonella;Insecticidalactivity;Chit
4、inase 21世紀(jì)全球農(nóng)業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要趨勢是更加注重農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全性,倡導(dǎo)安全優(yōu)質(zhì)綠色食品[1，2]，從天然植物中提取殺蟲活性物質(zhì)防治農(nóng)林害蟲,已成為研究熱點(diǎn),并對現(xiàn)代農(nóng)藥研究具有重要意義?！ 锥≠|(zhì)酶(chitinase)可以水解昆蟲體壁和中腸中的幾丁質(zhì)，在昆蟲變態(tài)發(fā)育過程中扮演重要角色。幾丁質(zhì)酶抑制劑通過抑制幾丁質(zhì)酶活性干擾昆蟲正常變態(tài)發(fā)育過程而達(dá)到殺蟲的目的。由于動(dòng)植物機(jī)體不含幾丁質(zhì)，故以幾丁質(zhì)酶作為靶標(biāo)的新型生物農(nóng)藥具有安全無害的優(yōu)點(diǎn)[3，4]。目前已篩選出近十種不同來源的幾丁質(zhì)酶抑制劑,包括糖類與肽類幾丁質(zhì)酶抑制劑[4]
5、。而有關(guān)青蒿葉、桉樹葉、紅樹植物白骨壤葉來源的幾丁質(zhì)酶抑制劑未見報(bào)道?！ 〈笙灻?Galleriamellonella)屬螟蛾科蠟螟亞科,是養(yǎng)蜂業(yè)的主要害蟲。由于大蠟螟易于人工飼養(yǎng)，在農(nóng)藥學(xué)上可作為生測試蟲[5]。本研究以大蠟螟為測試對象，研究青蒿葉、桉樹、紅樹植物白骨壤葉乙醇提取物對它的毒殺作用以及對蟲體幾丁質(zhì)酶活性的抑制作用，為開發(fā)新型安全植物源農(nóng)藥提供參考。1材料 大蠟螟蟲(廣西甘蔗研究所提供)。青蒿葉、桉樹葉、紅樹植物白骨壤葉采自廣西藥用植物園、廣西防城港等地。 2方法 2.1植物源農(nóng)藥提取物的制備稱取10g青蒿葉、桉樹葉
6、、紅樹植物白骨壤葉干燥粉末，加入20ml50%乙醇，超聲萃取20min，過濾，濾液減壓蒸餾，收集膏狀物并稱重，用95%的乙醇溶解，配制成濃度為100mg/ml的植物提取物母液備用?！ ?.2殺蟲實(shí)驗(yàn)選擇蟲齡與蟲體大小基本一致的試蟲20只，置于墊有中性濾紙的90mm保濕玻璃培養(yǎng)皿中,將植物提取物母液稀釋為1.5%的濃度(內(nèi)含1%的吐溫80)，作為供試藥液。采用小型噴霧器噴霧法對準(zhǔn)蟲噴霧,每皿噴藥液約1ml。對照組用95%的乙醇代替供試藥液，將培養(yǎng)皿放置于26℃的人工氣候培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h(晝夜比16∶8)。24h后檢查死蟲數(shù)，計(jì)算死亡率與校
7、正死亡率。死亡率(%)=(死亡的蟲子/蟲子總數(shù))×100%，校正死亡率(%)=[(死亡率-對照組死亡率)/(1-對照組死亡率)]×100%。測定活蟲體幾丁質(zhì)酶活力，計(jì)算酶活抑制率。每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)。 2.3蟲體蛋白質(zhì)含量的測定考馬斯亮藍(lán)G-250法測定大蠟螟蟲勻漿液中蛋白質(zhì)含量[6]?！ ?.4N-乙酰氨基葡萄糖還原糖的測定3，5-二硝基水楊酸(DNS)比色法測定[6]。 2.5幾丁質(zhì)酶液的提取與活性測定取1g蟲體，冰浴研磨勻漿,制成10%勻漿液，離心(3500r/min)20min取上清用于酶活的測定。取0.5ml上清液加入lml
8、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液(pH6.6)，0.5ml1.5%膠體幾丁質(zhì)，于37℃水浴振蕩酶反應(yīng)30min，立即沸水浴10min終止酶反應(yīng)后離心(4000r/min)5min后取上清液0.5ml，采用DNS法測
