資源描述：
《植物源農(nóng)藥殺蟲(chóng)與抑制幾丁質(zhì)酶活性的測(cè)定》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫(kù)。
1、植物源農(nóng)藥殺蟲(chóng)與抑制幾丁質(zhì)酶活性的測(cè)定作者：周桂孫果宋，黃科林，林潤(rùn)國(guó)，張桂華，鄧光輝【摘要】目的研究青蒿葉、桉樹(shù)葉、紅樹(shù)植物白骨壤葉乙醇提取物對(duì)大蠟螟蟲(chóng)的毒殺作用以及對(duì)蟲(chóng)體幾丁質(zhì)酶活性的抑制作用。方法采用室內(nèi)藥液噴蟲(chóng)法測(cè)定3種植物乙醇提取物的殺蟲(chóng)活性與抑制幾丁質(zhì)酶活性。結(jié)果青蒿、桉樹(shù)、紅樹(shù)植物白骨壤葉乙醇提取物對(duì)大蠟螟24h的校正死亡率分別為(69.00±3.87)%，(53.47±11.63)%，(18.60±6.70)%。對(duì)大蠟螟幾丁質(zhì)酶的抑制率分別為(20.33±1.42)%，(20.59±1.72)%，(13.56±1.58)
2、%。結(jié)論青蒿葉與桉樹(shù)葉植物乙醇提取物的殺蟲(chóng)活性與抑制幾丁質(zhì)酶活性顯著高于紅樹(shù)植物白骨壤葉乙醇提取物(P<0.05)?！娟P(guān)鍵詞】植物源農(nóng)藥;大蠟螟;殺蟲(chóng)活性;幾丁質(zhì)酶 Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofsouthernangroveavicenniamarinaleavesethanolextractsontheinsecticidalactivityandchitinaseinhibitoryactivityagainstGalleriamellonella.MethodsTheinsec
3、ticidalactivityandchitinaseinhibitoryactivityofthethreeplantethanolextractsethod.ResultsTheresultsshoent,thecorrecteddeathratiosofsouthernangroveavicenniamarinaleavesethanolextractangroveavicenniamarinaleavesethanolextractmarkedly. Keyellonella;Insecticidalactivity;Chit
4、inase 21世紀(jì)全球農(nóng)業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要趨勢(shì)是更加注重農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全性,倡導(dǎo)安全優(yōu)質(zhì)綠色食品[1，2]，從天然植物中提取殺蟲(chóng)活性物質(zhì)防治農(nóng)林害蟲(chóng),已成為研究熱點(diǎn),并對(duì)現(xiàn)代農(nóng)藥研究具有重要意義?！ 锥≠|(zhì)酶(chitinase)可以水解昆蟲(chóng)體壁和中腸中的幾丁質(zhì)，在昆蟲(chóng)變態(tài)發(fā)育過(guò)程中扮演重要角色。幾丁質(zhì)酶抑制劑通過(guò)抑制幾丁質(zhì)酶活性干擾昆蟲(chóng)正常變態(tài)發(fā)育過(guò)程而達(dá)到殺蟲(chóng)的目的。由于動(dòng)植物機(jī)體不含幾丁質(zhì)，故以幾丁質(zhì)酶作為靶標(biāo)的新型生物農(nóng)藥具有安全無(wú)害的優(yōu)點(diǎn)[3，4]。目前已篩選出近十種不同來(lái)源的幾丁質(zhì)酶抑制劑,包括糖類與肽類幾丁質(zhì)酶抑制劑[4]
5、。而有關(guān)青蒿葉、桉樹(shù)葉、紅樹(shù)植物白骨壤葉來(lái)源的幾丁質(zhì)酶抑制劑未見(jiàn)報(bào)道?！ 〈笙灻?Galleriamellonella)屬螟蛾科蠟螟亞科,是養(yǎng)蜂業(yè)的主要害蟲(chóng)。由于大蠟螟易于人工飼養(yǎng)，在農(nóng)藥學(xué)上可作為生測(cè)試蟲(chóng)[5]。本研究以大蠟螟為測(cè)試對(duì)象，研究青蒿葉、桉樹(shù)、紅樹(shù)植物白骨壤葉乙醇提取物對(duì)它的毒殺作用以及對(duì)蟲(chóng)體幾丁質(zhì)酶活性的抑制作用，為開(kāi)發(fā)新型安全植物源農(nóng)藥提供參考。1材料 大蠟螟蟲(chóng)(廣西甘蔗研究所提供)。青蒿葉、桉樹(shù)葉、紅樹(shù)植物白骨壤葉采自廣西藥用植物園、廣西防城港等地?！ ?方法 2.1植物源農(nóng)藥提取物的制備稱取10g青蒿葉、桉樹(shù)葉
6、、紅樹(shù)植物白骨壤葉干燥粉末，加入20ml50%乙醇，超聲萃取20min，過(guò)濾，濾液減壓蒸餾，收集膏狀物并稱重，用95%的乙醇溶解，配制成濃度為100mg/ml的植物提取物母液備用?！ ?.2殺蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)選擇蟲(chóng)齡與蟲(chóng)體大小基本一致的試蟲(chóng)20只，置于墊有中性濾紙的90mm保濕玻璃培養(yǎng)皿中,將植物提取物母液稀釋為1.5%的濃度(內(nèi)含1%的吐溫80)，作為供試藥液。采用小型噴霧器噴霧法對(duì)準(zhǔn)蟲(chóng)噴霧,每皿噴藥液約1ml。對(duì)照組用95%的乙醇代替供試藥液，將培養(yǎng)皿放置于26℃的人工氣候培養(yǎng)箱培養(yǎng)24h(晝夜比16∶8)。24h后檢查死蟲(chóng)數(shù)，計(jì)算死亡率與校
7、正死亡率。死亡率(%)=(死亡的蟲(chóng)子/蟲(chóng)子總數(shù))×100%，校正死亡率(%)=[(死亡率-對(duì)照組死亡率)/(1-對(duì)照組死亡率)]×100%。測(cè)定活蟲(chóng)體幾丁質(zhì)酶活力，計(jì)算酶活抑制率。每處理設(shè)3個(gè)重復(fù)。 2.3蟲(chóng)體蛋白質(zhì)含量的測(cè)定考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定大蠟螟蟲(chóng)勻漿液中蛋白質(zhì)含量[6]?！ ?.4N-乙酰氨基葡萄糖還原糖的測(cè)定3，5-二硝基水楊酸(DNS)比色法測(cè)定[6]?！ ?.5幾丁質(zhì)酶液的提取與活性測(cè)定取1g蟲(chóng)體，冰浴研磨勻漿,制成10%勻漿液，離心(3500r/min)20min取上清用于酶活的測(cè)定。取0.5ml上清液加入lml
8、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液(pH6.6)，0.5ml1.5%膠體幾丁質(zhì)，于37℃水浴振蕩酶反應(yīng)30min，立即沸水浴10min終止酶反應(yīng)后離心(4000r/min)5min后取上清液0.5ml，采用DNS法測(cè)
