hplcelsd法測定甘草中3種甘草皂苷的含量論文

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1、HPLCELSD法測定甘草中3種甘草皂苷的含量論文葉靜肖美添,湯須崇,黃雅燕【摘要】目的建立測定甘草藥材中甘草皂苷G2、甘草酸銨、烏拉爾甘草皂苷B含量的方法。方法采用HPLCELSD法,HypersilC18柱(5μm,4.6mm×150mm),以甲醇乙酸銨水溶液(0.2mol/L)冰乙酸(體積比65∶34∶1)為流動相,流速1.0mL/min,ELSD漂移管溫度110℃.freelin。結果甘草皂苷G2、甘草酸銨、烏拉爾甘草皂苷B的線性范圍分別為6.02~120.4,13.22~264.4,6.32~126.4μg/mL(r值分別為0.9996,0.999

2、7,0.9998),平均回收率(n=6)為100.6%,100.8%和99.87%。結論本法簡便,重現(xiàn)性好,可用于甘草中甘草皂苷G2、甘草酸銨、烏拉爾甘草皂苷B含量的測定?!娟P鍵詞】甘草;甘草皂苷G2;甘草酸銨;烏拉爾甘草皂苷B;HPLCELSDAbstract:ObjectiveoestablishaquantitativemethodfordeterminingthecontentofsaponinG2,ammoniumglycyrrhizinateanduralsaponinBinGlycyrrhizauralensis.MethodHPLCELSDmet

3、hodplesn(5μm,4.6mm×150mm)byusingmethanol0.2mol·L-1ammoniumacetateglacialaceticacid(65∶34∶1)asmobilephase.ThefloL·min-1andthetemperatureofdrifttubein-1.ResultsThelinearrangesofsaponinG2,ammoniumglycyrrhizinateanduralsaponinBL-1,respectivelyandtheiraveragerecoveries(n=6)ethodisconvenie

4、nt,reliableandcanbeusedforanalyzingsaponinG2,ammoniumglycyrrhizinateanduralsaponinBinGlycyrrhizauralensis.Keymoniumglycyrrhizinate;uralsaponinB;HPLCELSD甘草是豆科植物GlycyrrhizauralensisFisch的干燥根莖和根,是常用且重要的中藥材,.freeladzuSPD10AVP高效液相色譜儀(配備CBM102色譜工作站),AlltechELSD2000型蒸發(fā)光散射檢測器,超純水器(Milipore)

5、。甘草藥材購自江西省樟樹藥材市場,經(jīng)本實驗室鑒定;甘草皂苷G2、甘草酸銨和烏拉爾甘草皂苷B對照品為本試驗室用制備型HPLC分離而得,經(jīng)IR、MS、1HNMR、13CNMR等手段(方法)鑒定結構,HPLC法測定含量,以峰面積歸一化法計算,含量均大于99.0%。乙腈、甲醇(色譜純,Merck公司),水為超純水,其余試劑均為分析純。2方法與結果2.1色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗色譜柱:HypersilC18柱(5μm,4.6mm×150mm);流動相:甲醇0.2mol/L乙酸銨水溶液冰乙酸(體積比65∶34∶1);流速1.0mL/min;柱溫為室溫;進樣量:20μL;

6、ELSD檢測器檢測參數(shù):漂移管溫度110℃;載氣(N2)流速2.8L/min。理論塔板數(shù)按甘草酸銨峰計算應不低于2000,在此條件下甘草皂苷G2、甘草酸銨、烏拉爾甘草皂苷B達到基線分離,且各自峰形較好,色譜圖見圖1。2.2對照品及供試品溶液的制備2.2.1對照品溶液的制備精密稱取對照品甘草皂苷G23.01mg、甘草酸銨6.61mg、烏拉爾甘草皂苷B3.16mg,置同一25mL量瓶中加適量甲醇溶解,稀釋至刻度,搖勻,即得混合對照品溶液。實驗前以0.45μm濾膜濾過,備用。2.2.2供試品溶液的制備取本品粗粉約0.5mg,精密稱定,加入約30mL流動相,超聲提取3次,每

7、次30min,合并提取液,濾過,放冷,加流動相定容至100mL量瓶中,即得供試品溶液。實驗前以0.45μm濾膜濾過,備用。2.3線性試驗分別精密量取上述混合對照品溶液0.5、1、2、4、6、8、10mL于10mL量瓶中,加流動相稀釋至刻度,搖勻,進樣20μL。分別以峰面積的積分值為縱坐標,對照品的質(zhì)量濃度(μg/mL)為橫坐標,得3種成分的線性回歸方程分別為:甘草皂苷G2:Y=201.1X-79.038(r=0.9996),線性范圍為6.02~120.4μg/mL;甘草酸銨:Y=90.79X-28.499(r=0.9997),線性范圍為13.22~264.4μg

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