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《luciferase熒光素酶報(bào)告檢測試劑盒,promega》由會(huì)員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在應(yīng)用文檔-天天文庫。
1、為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃luciferase熒光素酶報(bào)告檢測試劑盒,promega 雙熒光素酶報(bào)告基因分析 轉(zhuǎn)載請注明來自丁香園 發(fā)布日期:XX-04-0810:59文章 關(guān)鍵詞:雙熒光素酶基因表達(dá)報(bào)告基因檢測 1.介紹 熒光素酶報(bào)告基因表達(dá)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控常被用來研究培養(yǎng)細(xì)胞的生物學(xué)特性。熒光素酶是理想的報(bào)告基因,因?yàn)椴溉閯?dòng)物細(xì)胞中不含內(nèi)源性熒光素酶,一旦轉(zhuǎn)錄完成立刻就生成功能性的熒光素酶。 Dual-Luciferase?雙熒
2、光素酶報(bào)告基因檢測系統(tǒng)中含有在同一細(xì)胞中同時(shí)表達(dá)的兩種熒光素酶。通常,報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)中往往會(huì)受到各種實(shí)驗(yàn)條件的影響,共轉(zhuǎn)染的“對照”報(bào)告基因會(huì)作為內(nèi)對照,為試驗(yàn)提供一基準(zhǔn)線。實(shí)驗(yàn)報(bào)告基因經(jīng)過內(nèi)參照的處理可以減小細(xì)胞活性和轉(zhuǎn)染效率對實(shí)驗(yàn)的影響,因此雙報(bào)告系統(tǒng)減少了外部干擾,使得實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)更可信。實(shí)驗(yàn)中報(bào)告基因和對照基因的酶沒有種源同源性,螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶對應(yīng)不同的反應(yīng)底物,反應(yīng)中沒有任何的交叉干擾。目的-通過該培訓(xùn)員工可對保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全
3、感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 螢火蟲熒光素酶底物和海腎熒光素酶底物分別與檢測試劑反應(yīng)可以使靈敏度最大化。由于超強(qiáng)的光信號和超高的信噪比,本系統(tǒng)被廣泛用于制藥和生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)中。雙熒光素酶報(bào)告基因檢測系統(tǒng)適配于各種培養(yǎng)哺乳細(xì)胞的培養(yǎng)基,如1640,MEM,DMEM,F(xiàn)12等。這些試劑與被動(dòng)裂解液所附帶的試劑盒,可以從Promega試劑盒中分開(轉(zhuǎn)載于:寫論文網(wǎng):luciferase熒光素酶報(bào)告檢測試劑盒,promega),單獨(dú)使用?! 【哂?/p>
4、超高靈敏度和超寬線性范圍的Veritas?微孔板發(fā)光檢測儀特別適合DLR報(bào)告基因檢測系統(tǒng),Veritas?軟件中預(yù)裝了DLR的檢測程序使得安裝更為方便,內(nèi)置自動(dòng)加樣器使得應(yīng)用更為簡單?! eritas?微孔板發(fā)光檢測儀使用熒光素酶檢測試劑II(LARII)最低可以檢測到1X10-19mol熒光素酶分子,使用Stop&Glo?試劑可以檢測到1X10-18mol海腎熒光素酶分子,檢測線性范圍分別為8和6個(gè)數(shù)量級。所有的檢測均采用純化的重組螢火蟲熒光素酶(E1701)和純化的重組海腎熒光素酶?! D1-3使用Promega公司D
5、ual-Luciferase?雙熒光素酶報(bào)告基因檢測系統(tǒng),螢火 蟲熒光素酶(1x10-19到1x10-11mol)和海腎熒光素酶(1x10-14mol)在Modulus?儀上測量結(jié)果?! ?.所需器材目的-通過該培訓(xùn)員工可對保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項(xiàng)目的正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 ?Veritas?微孔板發(fā)光檢測儀(P/N9100-002) ?96孔白板(E&KS
6、cientificEK-25075) ?Dual-LuciferaseReporter?熒光素酶檢測系統(tǒng)(E1980) ?P200移液器和槍頭 3.實(shí)驗(yàn)方案 試劑制備 熒光素酶檢測緩沖液II和熒光素酶檢測底物:使用所提供產(chǎn)品,-20℃儲(chǔ)存,可以穩(wěn)定保存6個(gè)月,熒光素酶檢測底物可以4℃保存1個(gè)月。將熒光素酶檢測緩沖液II加入熒光素酶檢測底物中,配制DLR工作液,顛倒混合,直到底物徹底溶解。配好試劑最好當(dāng)天使用,也可以將配好試劑分裝,-20°C儲(chǔ)存1月,-70℃儲(chǔ)存1年?! top&Glo?底物和Stop&Glo?底
7、物緩沖液:使用所提供產(chǎn)品,-20℃儲(chǔ)存。Stop&Glo?底物溶解緩沖液:使用所提供產(chǎn)品,低于25℃儲(chǔ)存。在玻璃管或者硅化聚丙烯酸樹脂管中將50×Stop&Glo?底物稀釋成1×Stop&Glo?工作液。顛倒混合,工作液最好當(dāng)天使用,也可以將工作液分裝,-20°C儲(chǔ)存2周?! ”粍?dòng)裂解緩沖液:用去離子水將5x被動(dòng)裂解緩沖液稀釋成1x的,低于25°C保存。目的-通過該培訓(xùn)員工可對保安行業(yè)有初步了解,并感受到安保行業(yè)的發(fā)展的巨大潛力,可提升其的專業(yè)水平,并確保其在這個(gè)行業(yè)的安全感。為了適應(yīng)公司新戰(zhàn)略的發(fā)展,保障停車場安保新項(xiàng)目的
8、正常、順利開展,特制定安保從業(yè)人員的業(yè)務(wù)技能及個(gè)人素質(zhì)的培訓(xùn)計(jì)劃 注:因?yàn)闊晒馑孛富钚允軠囟扔绊?,在定量發(fā)光檢測過程中Dual-Luciferase?熒光素酶緩沖液II和Stop&Glo?緩沖液應(yīng)始終保持室溫?;旌显噭﹥龃婧笤俅问褂?,為確保試劑性能,應(yīng)在低于25℃條件下溶解。溶解后充分混