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1、學(xué)校代碼：10264研究生學(xué)號(hào)：M150101082上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文L-色氨酸和褪黑激素對(duì)中華絨螯蟹題目：血糖代謝及免疫性能的影響AnalysisoftheeffectofL-tryptophanandmelatoninonthehemolymphglucose英文題目：metabolismandimmuneperformanceintheEriocheirsinensis專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖研究方向：水產(chǎn)動(dòng)物免疫姓名：徐敏杰指導(dǎo)教師：楊筱珍、成永旭二O一八年四月二日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：我
2、恪守學(xué)術(shù)道德，崇尚嚴(yán)謹(jǐn)學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對(duì)所寫的內(nèi)容負(fù)責(zé)，并完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部
3、或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在年解密后適用本版權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密□學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會(huì)成員名單姓名工作單位職稱備注答辯地點(diǎn)答辯日期上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文L-色氨酸和褪黑激素對(duì)中華絨螯蟹血糖代謝及免疫性能的影響摘要中華絨螯蟹（Eriocheirsinensis）俗稱河蟹、毛蟹和大閘蟹，是一種分布廣泛的淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)品種。中華絨螯蟹因其味道鮮美而馳名中外、備受青睞，其富含的
4、巨大經(jīng)濟(jì)價(jià)值也使它名正言順地成為我國(guó)的名特優(yōu)水產(chǎn)品。近年來，由于中華絨螯蟹的市場(chǎng)需求量日益增長(zhǎng)，價(jià)格也節(jié)節(jié)攀升，養(yǎng)殖戶們開始爭(zhēng)相擴(kuò)大養(yǎng)殖規(guī)模和提高集約化程度，但與此同時(shí)也給中華絨螯蟹的養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大挑戰(zhàn)。一系列問題如農(nóng)藥、抗生素的濫用、養(yǎng)殖環(huán)境惡化和宿主免疫疲勞等給中華絨螯蟹的養(yǎng)殖帶來了極大損失。為了推行健康養(yǎng)殖的理念，我們探究了飼料中添加不同水平的L-色氨酸及其代謝產(chǎn)物——褪黑激素對(duì)中華絨螯蟹的血糖代謝及免疫性能的影響，并結(jié)合對(duì)腸道內(nèi)菌群多樣性的研究，以期為中華絨螯蟹的健康養(yǎng)殖奠定理論基礎(chǔ)。（1）投喂中華絨螯蟹
5、4組不同L-色氨酸添加量的飼料（L-色氨酸占比分別為0.36%、0.47%、0.73%和1.05%，分別記為第1、2、3和4組）30天后，測(cè)定血糖代謝相關(guān)指標(biāo)、糖酵解反應(yīng)過程中主要限速酶在組織中的表達(dá)量及血清和肝胰腺抗氧化和免疫相關(guān)指標(biāo)。結(jié)果顯示：飼料中添加不同含量的L-色氨酸對(duì)中華絨螯蟹血糖水平無顯著影響（P>0.05），平均約為4.62mmol/L。隨著飼料中L-色氨酸添加量的增加，肝胰腺糖原含量呈上升趨勢(shì)，其中第4組蟹肝糖原含量顯著高于第1組（P<0.05）。此外，在對(duì)中華絨螯蟹糖原磷酸化酶活性進(jìn)行測(cè)定分析時(shí)
6、發(fā)現(xiàn)L-色氨酸對(duì)其影響并不顯著（P>0.05）。采用熒光定量PCR分別探究了丙酮酸激酶（Pyruvatekinase,PK）和糖原合成酶激酶3（Glycogensynthasekinase3,GSK3）在中華絨螯蟹十種不同組織（眼柄、胸神經(jīng)節(jié)、腦神經(jīng)節(jié)、腸、肝胰腺、胃、心、血、肌肉和鰓）中的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)均有表達(dá)但不同組織間的相對(duì)表達(dá)量差異顯著（P<0.05）。PKmRNA在心臟I上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文組織中的相對(duì)表達(dá)量最高，顯著高于其他組織（P<0.05），而在眼柄中表達(dá)最低。GSK3mRNA在胸神經(jīng)節(jié)中的相對(duì)
7、表達(dá)量最高，顯著高于其他組織（P<0.05），同樣的也是在眼柄中表達(dá)最低。此外，我們還分析了不同L-色氨酸飼料投喂后，中華絨螯蟹PK和GSK3mRNA在4種不同組織中的表達(dá)情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：中華絨螯蟹心臟和腦神經(jīng)節(jié)中PKmRNA的相對(duì)表達(dá)量無明顯變化（P>0.05）。但在胸神經(jīng)節(jié)和肌肉組織中，隨著飼料中L-色氨酸添加量的增加，PKmRNA的相對(duì)表達(dá)量也顯著上升（P<0.05）。同樣地，各組蟹腦神經(jīng)節(jié)中GSK3mRNA的相對(duì)表達(dá)量也無顯著變化（P>0.05），而隨著飼料中L-色氨酸含量的提高，胸神經(jīng)節(jié)、心臟和鰓組織中G
8、SK3mRNA的相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組而言有顯著提高（P<0.05）。不同L-色氨酸飼料投喂后，中華絨螯蟹血清T-AOC、T-SOD和ACP活力及肝胰腺T-AOC均未發(fā)生顯著變化（P>0.05），但血清CAT和AKP活性卻隨著L-色氨酸添加量的增加而呈上升趨勢(shì)。其中，第4組中華絨螯蟹血清的CAT和AKP活性顯著高于第1組（P<0.05）。攝食試驗(yàn)組飼料后中華絨螯
