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1、學(xué)校代碼：10264研究生學(xué)號：M150101082上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文L-色氨酸和褪黑激素對中華絨螯蟹題目：血糖代謝及免疫性能的影響AnalysisoftheeffectofL-tryptophanandmelatoninonthehemolymphglucose英文題目：metabolismandimmuneperformanceintheEriocheirsinensis專業(yè)：水產(chǎn)養(yǎng)殖研究方向：水產(chǎn)動物免疫姓名：徐敏杰指導(dǎo)教師：楊筱珍、成永旭二O一八年四月二日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：我
2、恪守學(xué)術(shù)道德，崇尚嚴謹學(xué)風(fēng)。所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)明確注明和引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品及成果的內(nèi)容。論文為本人親自撰寫，我對所寫的內(nèi)容負責，并完全意識到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔。學(xué)位論文作者簽名：日期：年月日上海海洋大學(xué)學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部門或機構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱或借閱。本人授權(quán)上海海洋大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部
3、或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□，在年解密后適用本版權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密□學(xué)位論文作者簽名：指導(dǎo)教師簽名：日期：年月日日期：年月日上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文答辯委員會成員名單姓名工作單位職稱備注答辯地點答辯日期上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文L-色氨酸和褪黑激素對中華絨螯蟹血糖代謝及免疫性能的影響摘要中華絨螯蟹（Eriocheirsinensis）俗稱河蟹、毛蟹和大閘蟹，是一種分布廣泛的淡水養(yǎng)殖經(jīng)濟品種。中華絨螯蟹因其味道鮮美而馳名中外、備受青睞，其富含的
4、巨大經(jīng)濟價值也使它名正言順地成為我國的名特優(yōu)水產(chǎn)品。近年來，由于中華絨螯蟹的市場需求量日益增長，價格也節(jié)節(jié)攀升，養(yǎng)殖戶們開始爭相擴大養(yǎng)殖規(guī)模和提高集約化程度，但與此同時也給中華絨螯蟹的養(yǎng)殖業(yè)帶來了巨大挑戰(zhàn)。一系列問題如農(nóng)藥、抗生素的濫用、養(yǎng)殖環(huán)境惡化和宿主免疫疲勞等給中華絨螯蟹的養(yǎng)殖帶來了極大損失。為了推行健康養(yǎng)殖的理念，我們探究了飼料中添加不同水平的L-色氨酸及其代謝產(chǎn)物——褪黑激素對中華絨螯蟹的血糖代謝及免疫性能的影響，并結(jié)合對腸道內(nèi)菌群多樣性的研究，以期為中華絨螯蟹的健康養(yǎng)殖奠定理論基礎(chǔ)。（1）投喂中華絨螯蟹
5、4組不同L-色氨酸添加量的飼料（L-色氨酸占比分別為0.36%、0.47%、0.73%和1.05%，分別記為第1、2、3和4組）30天后，測定血糖代謝相關(guān)指標、糖酵解反應(yīng)過程中主要限速酶在組織中的表達量及血清和肝胰腺抗氧化和免疫相關(guān)指標。結(jié)果顯示：飼料中添加不同含量的L-色氨酸對中華絨螯蟹血糖水平無顯著影響（P>0.05），平均約為4.62mmol/L。隨著飼料中L-色氨酸添加量的增加，肝胰腺糖原含量呈上升趨勢，其中第4組蟹肝糖原含量顯著高于第1組（P<0.05）。此外，在對中華絨螯蟹糖原磷酸化酶活性進行測定分析時
6、發(fā)現(xiàn)L-色氨酸對其影響并不顯著（P>0.05）。采用熒光定量PCR分別探究了丙酮酸激酶（Pyruvatekinase,PK）和糖原合成酶激酶3（Glycogensynthasekinase3,GSK3）在中華絨螯蟹十種不同組織（眼柄、胸神經(jīng)節(jié)、腦神經(jīng)節(jié)、腸、肝胰腺、胃、心、血、肌肉和鰓）中的表達情況，發(fā)現(xiàn)均有表達但不同組織間的相對表達量差異顯著（P<0.05）。PKmRNA在心臟I上海海洋大學(xué)碩士學(xué)位論文組織中的相對表達量最高，顯著高于其他組織（P<0.05），而在眼柄中表達最低。GSK3mRNA在胸神經(jīng)節(jié)中的相對
7、表達量最高，顯著高于其他組織（P<0.05），同樣的也是在眼柄中表達最低。此外，我們還分析了不同L-色氨酸飼料投喂后，中華絨螯蟹PK和GSK3mRNA在4種不同組織中的表達情況。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：中華絨螯蟹心臟和腦神經(jīng)節(jié)中PKmRNA的相對表達量無明顯變化（P>0.05）。但在胸神經(jīng)節(jié)和肌肉組織中，隨著飼料中L-色氨酸添加量的增加，PKmRNA的相對表達量也顯著上升（P<0.05）。同樣地，各組蟹腦神經(jīng)節(jié)中GSK3mRNA的相對表達量也無顯著變化（P>0.05），而隨著飼料中L-色氨酸含量的提高，胸神經(jīng)節(jié)、心臟和鰓組織中G
8、SK3mRNA的相對表達量較對照組而言有顯著提高（P<0.05）。不同L-色氨酸飼料投喂后，中華絨螯蟹血清T-AOC、T-SOD和ACP活力及肝胰腺T-AOC均未發(fā)生顯著變化（P>0.05），但血清CAT和AKP活性卻隨著L-色氨酸添加量的增加而呈上升趨勢。其中，第4組中華絨螯蟹血清的CAT和AKP活性顯著高于第1組（P<0.05）。攝食試驗組飼料后中華絨螯
