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1、免疫學(xué)檢查(Immunologictest)陜西中醫(yī)學(xué)院診斷學(xué)教研室一、檢查內(nèi)容1.評估機體的免疫功能狀態(tài)2.檢測與自身免疫病相關(guān)的抗體或致敏T細胞3.檢測與過敏性疾病相關(guān)的變應(yīng)原或IgE抗體4.檢測某些致病微生物的抗原或抗體5.檢測某些腫瘤抗原、激素含量二、常用的免疫檢查方法1.沉淀試驗2.凝集試驗3.補體結(jié)合試驗4.中和試驗5.熒光免疫技術(shù)6.酶免疫技術(shù)7.放射免疫技術(shù)8.發(fā)光免疫技術(shù)9.時間分辨熒光免疫技術(shù)10.流式細胞儀分析技術(shù)11.分子生物學(xué)分析技術(shù)三、機體免疫功能檢查(一)非特異性免疫功能測定1
2、.血清蛋白區(qū)帶電泳-+白蛋白α1、α2球蛋白β1、β2球蛋白γ-球蛋白血清蛋白區(qū)帶電泳示意圖譜2.外周血中性粒細胞計數(shù)，趨化、吞噬、殺菌功能測定①趨化功能降低：易反復(fù)感染、齒齦炎、中耳炎、Chediak-Higashi綜合征、遲鈍性白細胞綜合征、有肌蛋白功能不全、高于IgE綜合征等。 ②吞噬功能降低：中性粒功能異常綜合征、補體所致調(diào)理缺陷癥、膜糖蛋白缺陷癥、慢性肉芽腫、肌動蛋白功能不全等。 ③殺菌功能降低：慢性肉芽腫、多發(fā)性骨髓瘤、巨球蛋白血癥、慢性粒白血病、糖尿病等三、機體免疫功能檢查3.血清總補體、C3
3、、C4、B因子、溶菌酶測定①補體降低：自身免疫病，易反復(fù)感染等②補體增高：風(fēng)濕熱急性期、結(jié)節(jié)性多動脈炎、皮肌炎、心梗、Reiter綜合征等③B因子降低：表示補體旁路途徑激活④溶菌酶：↑見于白血病、腎臟疾??；↓見于腫瘤患者三、機體免疫功能檢查2.B淋巴細胞功能檢查①血清IgG含量測定②特異性抗體產(chǎn)生能力的體內(nèi)試驗白喉類毒素、破傷風(fēng)類毒素、肺炎球菌多糖抗原、流感嗜血桿菌多糖抗原接種后5~7天能檢測到IgM型抗體，再次免疫后1周產(chǎn)生IgG型抗體。③特異性抗體產(chǎn)生能力的體外試驗洗滌++→低倍鏡下計數(shù)酶點數(shù)(抗體生成
4、細胞數(shù))Ag吸附醋纖膜外周血單個核細胞5%CO237℃×6h生物素溫育抗體洗滌酶復(fù)合物底物三、機體免疫功能檢查3.淋巴結(jié)或組織活檢淺皮質(zhì)區(qū)——B細胞的居住地深皮質(zhì)區(qū)——T細胞的居住地髓質(zhì)——漿細胞(受抗原刺激)/髓索及髓竇(靜止淋巴結(jié))直腸粘膜固有層有豐富的漿細胞和IgA抗體分泌細胞常見與體液免疫功能缺陷的疾病1.性聯(lián)無丙種球蛋白血癥2.普通變異型免疫缺陷病3.高IgM綜合征4.選擇性IgA缺陷病5.IgG亞類缺陷癥三、機體免疫功能檢查(三)細胞免疫功能檢查1.T細胞數(shù)量檢查CD3+成熟T細胞(69.4±4
5、.86%)CD4+輔助T細胞、誘導(dǎo)T細胞、殺傷T細胞、單核吞噬細胞(41.17±5.28%)CD8+抑制T細胞、毒性T細胞、反抑制T細胞(24.58±4.02%)2.T細胞功能檢查①T細胞轉(zhuǎn)化試驗(60%~80%)②抑制性T細胞功能檢測(40%±10%)③T細胞介導(dǎo)細胞毒試驗三、機體免疫功能檢查3.mIL-2R細胞檢測mIL-2R陽性細胞是T細胞活化的標(biāo)志(正常人的PBMC靜息狀態(tài)為2%~6%，PHA誘導(dǎo)培養(yǎng)后為22%~39%)靜息時過度表達提示有免疫病理損害誘導(dǎo)后表達率降低提示患者細胞免疫功能不全4.嬰幼
6、兒側(cè)位胸片若不見胸腺陰影，提示有T細胞缺陷5.淋巴結(jié)活檢若皮質(zhì)區(qū)和副皮質(zhì)區(qū)界線不清，生發(fā)中心消失，提示有T細胞缺陷6.成人PPD5u,48~72h后紅腫、硬結(jié)或直徑<5mm，提示有細胞免疫功能不全。三、機體免疫功能檢查(三)NK細胞活性檢查C’PDAFDA*+活性降低：腫瘤、白血病、自身免疫病、對病毒、真菌易感活性增高：多發(fā)性骨髓瘤、骨髓移植、EBV、HSV、TB感染的早期，習(xí)慣性流產(chǎn)注PDA*：乙酰乙酸羧基熒光素，F(xiàn)DA*：羧基熒光素K562FDA*5%CO237℃×4hNKK562K562FDA*流式細
7、胞儀測定活的K562細胞的熒光來推知NK細胞的活性三、機體免疫功能檢查1.ANAHep-2細胞做抗原片最敏感，熒光圖像最清晰，若結(jié)合靈長類動物器官組織冷凍切片做抗原，能檢出更多的自身抗 體。均質(zhì)型：抗組蛋白抗體，見于所有活動期SLE者周邊型：抗ds-DNA，見于SLE，特別伴腎炎者核仁型：抗核糖體或抗U3RNP，見于SLE、SSc散在斑點型：抗著絲點抗體，見于Crest綜合征斑點型：抗uRNP抗體(核糖核蛋白)，高滴度見于MCTD，SLE、SSc抗SM抗體(U族RNA)，見于30%~40%SLE抗Scl-7
8、0抗體(非組蛋白染色體蛋白)，見于15%~20%SSc抗SSA/Ro抗體(Y1-Y5RNP)，見于SLE、pSS抗SSB/La抗體(RNA聚合酶Ⅲ轉(zhuǎn)錄物)，見于pss、ssc抗K抗體(非組蛋白酸性核蛋白)，見于SLE、SSc四、自身抗體檢查2.ENA(extractablenuclearantigen)是源于小牛胸腺、豬脾，在鹽水中溶解的一部分核抗原，通過免疫印跡技術(shù)將不同分子量的抗原分開，可檢出抗SM、抗uRN
