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《神經(jīng)干細(xì)胞定向分化為多巴胺能神經(jīng)元過程中Mash1及Hes1基因的表達(dá).pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、解剖學(xué)研究2015年第37卷第3期AnatRes，2015．V01．37．N0．3167·論著·神經(jīng)干細(xì)胞定向分化為多巴胺能神經(jīng)元過程中Mashl及Hesl基因的表達(dá)張君度，龍大宏，陳艷，劉菲菲，龍靜怡(廣州醫(yī)科大學(xué)人體解剖學(xué)教研室，廣東廣州510182)【摘要】目的建立神經(jīng)干細(xì)胞(NSCs)分化為多巴胺能神經(jīng)元的體外模型，并進(jìn)一步研究此分化過程中Mashl及Hesl基因的表達(dá)變化。方法無(wú)菌條件下取孕14—16d胎鼠端腦進(jìn)行NSCs體外培養(yǎng)。將NSCs進(jìn)行Nestin免疫熒光檢測(cè)，對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組(GDNF+IL．1et聯(lián)合組)誘導(dǎo)2周后進(jìn)行B—tubulinⅢ和TH免疫熒
2、光染色，計(jì)算各組陽(yáng)性細(xì)胞率，熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)P4代NSCs分化1周和2周時(shí)Mash1及Hesl基因的表達(dá)變化。結(jié)果免疫熒光檢測(cè)結(jié)果顯示，NSCs的Nestin陽(yáng)性細(xì)胞率為(93．04+3．55)％，誘導(dǎo)分化2周后對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組p．tubulin111陽(yáng)性細(xì)胞率分別為(12．65+1．58)％和(33．95~2．97)％，兩組間比較差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。對(duì)照組、實(shí)驗(yàn)組TH陽(yáng)性細(xì)胞率分別為(1．46~0．41)％、(15．51~1．94)％，差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0．05)。熒光定量PCR結(jié)果顯示，NSCs誘導(dǎo)分化后，Mashl基因表達(dá)較未分化狀態(tài)時(shí)升高
3、，各組間比較差異存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，實(shí)驗(yàn)組高于對(duì)照組(P<0．05)，分化2周高于1周(P<0．01)；Hesl基因于分化后表達(dá)降低，對(duì)照組與對(duì)實(shí)驗(yàn)組之間以及分化1周與2周之間比較差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0．05)。結(jié)論GDNF和IL．1聯(lián)合作用能夠誘導(dǎo)NSCs定向分化為多巴胺能神經(jīng)元；Mashl與Hes1基因可能參與NSCs分化為多巴胺能神經(jīng)元的過程?！娟P(guān)鍵詞】神經(jīng)干細(xì)胞；分化；多巴胺能神經(jīng)元；Mashl；HeslTheexpressionofMashlandHeslduringinduceneuralstemcellsdiferentiatingintodopaminer
4、gicneuronsZHANGJun—du，LONGDa-hong，CHENYon，LIUFei-fei．LONGJing-yi，DepartmentofAnatomyofGuangzhouMedwalUniversity，Guangzhou510182，ChinaCorrespondingauthor：LONGDa-hong，Email：2856478507@qq．com【Abstract】ObjectiveTobuildtheinvitromodeldofNSCsdiferentiateintodopaminegicneurons，andfurtherstudythe
5、expressionofMash1andHeslinthisprocess．MethodsSeparatedthetelencephalonofratembryosinsterileconditionandcul—turedinvitro，takeNSCsstainedbyNestinimmunofluorescenceassay，dividedintocon=groupandexp-group(GDNF+IL-let)andinducedintodopaminegicneurons，after2weeksstainedbyp-tubulinⅢandTH，andcount
6、edtherateofpositivecellsofeachgroup．q-PCRcheckedtheexpressionofMashlandHeslinNSCsandduringdiferentiatedintodopaminegicneurons．ResultsIFshowedthattherateofNestinpositivecellswas(93．04~3．55)％，Therewerenostatisticaldiferencebetweenthetwocomparison(P>0．05)．Afterdiferamiated2weeks，therateof13-
7、tubulinⅢpositivecellswere：I)4，con—group[(12．65~1．58)％]，exp—group[(33．95~2．97)％]，respectively，Therewerestatisticaldiferencebetweenthetwocomparison(P<0．05)；therateofTHpositivecellwere：P4,con—group[(10-41)％]，exp—group[(15．51~1．94)％]，Therewerestatisticaldiferencebetween
