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《根瘤農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻轉(zhuǎn)基因體系研究》由會員上傳分享,免費(fèi)在線閱讀,更多相關(guān)內(nèi)容在學(xué)術(shù)論文-天天文庫。
1、分類號51_§3_?學(xué)號20115201003為音泉達(dá)義每碩±學(xué)位論文根瘤農(nóng)巧菌介導(dǎo)的水稻轉(zhuǎn)基因體系研究煉艷冷指導(dǎo)教師江玲教授專業(yè)學(xué)位農(nóng)業(yè)推廣碩壬研究領(lǐng)域作物研究方向植物基因工程答辯日期二0—五年五月STUDY-MEDIATEDONTHEAGROBACTERIUMTRANSGENICMCEBYROOTNODULUESSYSTEMByChenYanlingADissertationSubmitted化NaninAricultur
2、aljggUniversity化PartialFulfillmentof化eRequirementsForTheMasterDereeofPhilosophgySupervisedbyPro化ssorJiangLingColleeofArie山tureggNaninAriculturalUniversitjggyNanin210095Chinajg,May,2(U5原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明:所呈交的學(xué)位論文,是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下,獨(dú)立進(jìn)
3、行研究工作所取得的成果,。除文中己經(jīng)注明引用的內(nèi)容外本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體。本人完全意識到本聲,均己在文中明確方式標(biāo)明明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者(需親筆)簽名;遂>王年t月^日學(xué)位論文版權(quán)使用授權(quán)書本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定,同意學(xué)校保留并向國家有關(guān)部口或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版,允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)南京農(nóng)業(yè)大學(xué)可(^將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫進(jìn)行檢
4、索>1,可1^采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密□,在年解密后適用本授權(quán)書。本學(xué)位論文屬于不保密口。""(請?jiān)冢咨戏娇騼?nèi)打V)學(xué)位論文作者(需親筆)簽名;於/J:年^月^日導(dǎo)師(需親筆)簽名;年^月^曰目錄目錄摘要IABSTRACTm符號與巧略語V一章文獻(xiàn)錫也第11植物轉(zhuǎn)基因研究進(jìn)展12水稽轉(zhuǎn)基因的研究進(jìn)展22.1水稻轉(zhuǎn)化受體的研究進(jìn)展32.2水稍轉(zhuǎn)基因方法的研究進(jìn)展42.3轉(zhuǎn)基因在水稻育種上的應(yīng)用82.4水
5、稻轉(zhuǎn)基因面臨的主要問題及對策112.5生物安全性問題122.6水稻基因工程的發(fā)展趨勢143本研究的目的及意義15第二章根瘡農(nóng)巧苗介導(dǎo)的水巧轉(zhuǎn)基因體系研究171材料與方法171.1植物材料171.2茜種與受體材糾171.3常用培養(yǎng)基1714愈.傷組織誘導(dǎo)181.5農(nóng)桿菌的培養(yǎng)181.6水稻愈傷組織與農(nóng)桿菌的共培養(yǎng)191.7抗性愈傷組織的篩選巧1.8抗性愈傷組織的分化191.9轉(zhuǎn)基因植株再生及移栽191.10觀察記載和統(tǒng)計(jì)方法202
6、結(jié)果與分析202.1成熟胚與未成熟巧愈傷誘導(dǎo)分析20i根瘤農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻轉(zhuǎn)基因體系研究222.2不同品種成熟巧在不同培養(yǎng)基上誘導(dǎo)情況,2.3不同品種轉(zhuǎn)化效率的差異222.4轉(zhuǎn)基因體系應(yīng)用效果分析253討論29第蘭章全文結(jié)論311總.31結(jié)2本研究的創(chuàng)新之處31參考文獻(xiàn)33附錄39S謝47m要根瘤農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻轉(zhuǎn)基因體系研究摘要水稻占我國糧食總量的約40%,也是世界上最重要的糧食作軟。由于水稻全基因組
7、測序已完成一,其已成為作物基因組研究的種典型的模式作物。水稻轉(zhuǎn)基因廣泛采用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法,此法優(yōu)點(diǎn)在于高效率、低費(fèi)用、周期短、拷貝數(shù)低和基因沉狄現(xiàn)象少等、轉(zhuǎn)化率等與其品種間的遺傳差異性存在密切聯(lián)系,水稻轉(zhuǎn)。然而水稻植株再生基因的研究重點(diǎn)逐步轉(zhuǎn)向如何建立新型的愈傷組織再生體系和農(nóng)桿茵轉(zhuǎn)化體系。本研究從梗稻aonica)品種寧巧1號、日、東梗等為材料Up本晴,進(jìn)行成熟胚和未成熟巧的愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng),通過根瘤農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化法,進(jìn)行愈傷組織的轉(zhuǎn)化,一從而構(gòu)由農(nóng)。結(jié)果表明建了套高效的桿茵介導(dǎo)的水稻轉(zhuǎn)基因體系,與成
8、熟胚相比,未成熟胚的胚性愈傷組織誘導(dǎo)率相對較高,與;不同品種在愈傷誘導(dǎo)上存在差異寧梗1號和日本晴相比,東梗的成熟胚和未成熟化的愈傷組織誘導(dǎo)率分別高達(dá)96.2%和〇96%,胚性率也高達(dá)95/〇;將不同目標(biāo)基因轉(zhuǎn)化上述王個(gè)品種成熟勝愈傷組織,調(diào)查抗性愈傷轉(zhuǎn)化率和抗性植株轉(zhuǎn)化率,