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《植物基因的圖位克隆》由會員上傳分享，免費在線閱讀，更多相關內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、生物技術通報BiotechnologyInformation2000年第4期#綜述與專論#1植物基因的圖位克隆Map-basedCloningforPlantsGene123王澤立戴景瑞王斌123WANGZe-liDAIJing-ruiWANGBin1山東農(nóng)業(yè)大學,泰安271018;2中國農(nóng)業(yè)大學,北京100094;3中國科學院遺傳所,北京1001011ShandongAgriculturalUniversity,Tai-an271018;2ChinaAgriculturalUniversity
2、,Beijing100094;3InstituteofGeneticsofChineseAcademyofScience,Beijing100101,China摘要:圖位克隆是分離基因的有效方法,本文概述了植物基因圖位克隆的研究進展,主要包括圖位克隆的一般策略、相關技術、發(fā)展前景和其它基因組領域研究于其帶來的有益借鑒。關鍵詞:分離群體;分子標記;基因;圖位克隆Abstract:Map-basedcloninghasalreadybecomeavaluablemethodforgeneisolat
3、ion.Thispapersummarizedthepro2gressesofthemapbasedcloninganddescribedthestrategiesinwhichshouldbeadoptedtocloneageneinplant.And,themainstepsformapbasedcloningarediscussedalso.Keyword:Segregatepopulation;molecularmarker;gene;map-basedcloning中圖分類號:Q943
4、.2文獻標識碼:A文章編碼:1002-5464(2000)04-021-07隨著作物遺傳水平的不斷提高和對生物新技循反向遺傳學途徑克隆基因有三種主要方法可術的渴求,研究者對諸如育種材料的遺傳多樣性、親資利用,分別是轉(zhuǎn)座子示蹤法、隨機突變體篩選法和本選擇指標、后裔評價方法等提出了更高的要求。圖位克隆法。其中,轉(zhuǎn)座子受其種類、活性、數(shù)量的因此從表現(xiàn)型選擇到基因型鑒別,特別是對有益基制約,隨機突變體篩選法則隨機性較大且不能控制因定位、克隆、轉(zhuǎn)移和累加,是人們?yōu)楂@取高產(chǎn)、優(yōu)失活基因的種類和數(shù)量,也限制了
5、其使用。比較而質(zhì)、多抗新品種(系)而應該關注的研究工作。然而言,圖位克隆法隨著相關配套技術的日漸成熟,數(shù)十無論對于控制質(zhì)量性狀的單(寡)基因還是與大多數(shù)個與農(nóng)業(yè)生產(chǎn)密切相關的作物基因已被成功的克[1,2,3,4,17,18,19]農(nóng)藝性狀有關的微效多基因來說,對其進行克隆都隆(表1)。本文擬對圖位克隆的研究需要建立和發(fā)展相關的技術和方法?，F(xiàn)代遺傳學的進展做一介紹,以期對植物遺傳育種和分子生物學發(fā)展為建立基因克隆新技術提供了理論指導。從遺研究有所助益。傳學的觀點來看,克隆基因的途徑可概括為正向遺1
6、圖位克隆的一般策略傳學和反向遺傳學兩種。正向遺傳學途徑指的是通圖位克隆(Map-basedcloning)又稱定位克隆過被克隆基因的產(chǎn)物或表現(xiàn)型突變?nèi)ミM行;反向遺(positionalcloning),1986年首先由劍橋大學的[5]傳學途徑則指的是依據(jù)被克隆基因在染色體上的位Alancoulson提出,用該方法分離基因是根據(jù)目的置來實現(xiàn)。由于絕大多數(shù)控制重要農(nóng)藝性狀的基因基因在染色體上的位置進行的,無需預先知道基因產(chǎn)物及調(diào)控機制尚不清楚,走正向遺傳學之路困難的DNA順序,也無需預先知道其表達產(chǎn)
7、物的有關較多,而反向遺傳學途徑則顯示出較好的前景。信息,但應有以下兩方面的基本情況:一是有一個根1作者簡介:王澤立,1957年生,男,博士,教授。主要研究方向:玉米遺傳育種。收稿日期:2000-01-20)21)生物技術通報BiotechnologyInformation2000年第4期據(jù)目的基因的有無建立起來的遺傳分離群體,如F、選基因組文庫;5)用獲得陽性克隆構(gòu)建目的基因區(qū)DH、BC、RI等。二是開展以下幾項工作:1)首先找域的跨疊群;6)通過染色體步行、登陸或跳躍獲得含到與目標基因緊密連鎖
8、的分子標記;2)用遺傳作圖有目標基因的大片段克隆;7)通過亞克隆獲得含有和物理作圖將目標基因定位在染色體的特定位置;目的基因的小片段克隆;8)通過遺傳轉(zhuǎn)化和功能互3)構(gòu)建含有大插入片段的基因組文庫(BAC庫或補驗證最終確定目標基因的堿基序列。下面將對其YAC);4)以與目標基因連鎖的分子標記為探針篩中幾個關鍵環(huán)節(jié)予以敘述。表1迄今已發(fā)表的用圖位克隆法克隆到的植物基因基因植物突變表型基因同源序列文獻AB13擬南芥脫落酸不敏感玉米轉(zhuǎn)錄子Girandat,etal.1992FID3擬南芥降低亞油酸飽和
