資源描述：
《CCID_50_法檢測流感病毒滴度方法的建立及驗(yàn)證》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫。
1、·978·中國生物制品學(xué)雜志2016年9月第29卷第9期ChinJBiologicalsSeptember2016，Vol.29No.9·技術(shù)方法·CCID50法檢測流感病毒滴度方法的建立及驗(yàn)證12，3141孫瑤，申鎮(zhèn)維，姜春來，孟祥博，徐菲1.吉林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院艾滋病疫苗國家工程實(shí)驗(yàn)室，吉林長春130012；2.長春百克生物科技股份公司，吉林長春130012；3.吉林大學(xué)第一醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究院免疫學(xué)研究所，吉林長春130061；4.吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院胃腸內(nèi)科，吉林長春130033摘要：目的建立基于MDCK細(xì)胞的三價(jià)流感減毒活疫苗病毒滴度檢測方法
2、，并進(jìn)行驗(yàn)證。方法以抗流感病毒血清中和三價(jià)流感減毒活疫苗中兩種型別病毒，采用CCID50法檢測未中和型別病毒感染性滴度，并對方法的專屬性、線性、準(zhǔn)確性、精密度、耐用性進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果樣品中的輔料成分、其他型別病毒和異源抗病毒血清均不會(huì)對病毒滴度測定結(jié)果產(chǎn)生干擾；該方法檢測H1N1、H3N2和B型流感病毒滴度的線性范圍分別為3.81～8.48、3.48～7.65和2.45～6.98logCCID／0.2ml，在線性范圍內(nèi)，線性回歸系數(shù)（R2）分別為1、0.9946和0.9945；該方法檢50測3種型別流感病毒滴度重復(fù)性和中間精密度的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（rela
3、tivestandarddeviation，RSD）均小于15%，平均回收率在85%～115%之間；同一樣品不同時(shí)間點(diǎn)檢出結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＞0.05）。結(jié)論建立的CCID50法專屬性、準(zhǔn)確度、線性、精密度、耐用性良好，是一種簡便、快速、成本低、檢測誤差小的方法，可用于三價(jià)流感減毒活疫苗病毒滴度的檢測。關(guān)鍵詞：CCID50；三價(jià)流感減毒活疫苗；病毒滴度；MDCK細(xì)胞中圖分類號：R373.1+3R392-33文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號：1004-5503（2016）09-0978-06DOI:10.13200/j.cnki.cjb.001458De
4、velopmentandvalidationofaCCID50methodfordeterminationofinfluenzavirustiter*SUNYao,SHENZhen-wei,JIANGChun-lai,MENGXiang-bo,XUFei*NationalEngineeringLaboratoryforAIDSVaccine,CollegeofLifeScience,JilinUniversity,Changchun130012,JilinProvince,ChinaCorrespondingauthor:XUFei,E-mail:f
5、eixu@jlu.edu.cnAbstract：ObjectiveTodevelopandvalidateaMadin-Darbycaninekidney（MDCK）celllinebasedpotencyassaytotestthetiteroftrivalentliveattenuatedinfluenzavaccine.MethodsTheinfectioustiterofnon-neutralizedviruswasdeterminedbyCCID50method.Thetestwasvalidatedforspecificity,linea
6、rity,accuracy,precisionandrobustness.ResultsTheviruspreservers,otherviralstrainsandheterologousantiserainsamplesshowednoinfluenceonthedeterminationresultofvirustiter.ThelinearrangesoftitersofinfluenzaH1N1,H3N2andBviruseswere3.81~8.48,3.48~7.65and2.45~6.98logCCID／0.2ml,withR2val
7、uesof1,0.9946and0.9945,respectively.Therelativestandard50deviations（RSDs）ofreproducibilityandintermediateprecisionofvirustitersofthethreetypeswerelessthan15%,whilethemeanrecoveryratewas85%~115%.Thedeterminationresultsofthesamesampleatvarioustimepointsshowednosignificantdifferen
8、ce（eachP>0.05）.ConclusionThedevelopedCCID50methodshowe
