石蠟包埋的步驟

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1、包埋時(shí)間50%酒精：1個(gè)小時(shí)70%酒精：1個(gè)小時(shí)80%酒精：1個(gè)小時(shí)90%酒精：1個(gè)小時(shí)95%酒精：1個(gè)小時(shí)無水酒精1：1個(gè)小時(shí)無水酒精2：1個(gè)小時(shí)無水酒精:二甲苯1:11個(gè)小時(shí)二甲苯透明：時(shí)間不定二甲苯:石蠟1:120-1個(gè)小時(shí)不等石蠟1：1個(gè)半小時(shí)石蠟2：1個(gè)半小時(shí)包埋的時(shí)間不確定，由組織塊的大小來決定，像一般的比較小的而且比較容易脫水的如消化道的胃、小腸等脫水半個(gè)小時(shí)至四十分就行，蝌蚪整體的話因?yàn)橛衅つw包著所以時(shí)間要長一些至少一個(gè)小時(shí)這樣算下來包完一套需要至少12個(gè)小時(shí)，包埋的關(guān)鍵不是脫水，而是在那兩步1：1上，只要這兩個(gè)過度做好了其余

2、的就很順暢了，只要1:1時(shí)間夠了透明時(shí)間就可以適當(dāng)?shù)亩桃恍?，一般不要超過1分鐘，30秒左右就可以。想做好石蠟切片從取材到染色每一步都很重要，可以說是環(huán)環(huán)相扣，哪一步?jīng)]做好都會(huì)影響最終的結(jié)果。現(xiàn)在從取材說起，取材時(shí)要迅速，以免組織自溶，固定要充分，固定液我們一般用的有兩種，一是10%中性福爾馬林溶液，第二是Bouin氏液，這個(gè)根據(jù)組織來決定用哪個(gè)，要是整體固定蝌蚪的話可以用濃度稍高一些的福爾馬林，一般可以用12—15%的福爾馬林。取下的材料需固定一段時(shí)間，至少要過夜，若是固定時(shí)間比較長的話需要用流水沖洗一個(gè)晚上第二天再脫水包埋，時(shí)間短的話，第二

3、天可以直接用水泡一個(gè)半小時(shí)即可進(jìn)行包埋，當(dāng)然這其中要換幾次水。包埋完切片，撈出的片子至少烘干一個(gè)晚上的時(shí)間。二甲苯2：30分鐘二甲苯1：30分鐘酒精:二甲苯1:1：10分鐘無水酒精2：5分鐘無水酒精1：5分鐘95%；5分鐘90%：5分鐘80%：5分鐘70%：5分鐘50%：5分鐘流水沖洗蘇木精時(shí)間不定，視當(dāng)時(shí)染液的情況而定。一般5-10分鐘，甚至更長。流水沖洗50%：5分鐘70%：5分鐘80%：5分鐘90%：5分鐘伊紅30秒，吸水紙上吸一下染液95%：蘸三下無水酒精1：5分鐘無水酒精2：5分鐘酒精:二甲苯1:110分鐘二甲苯1：30分鐘二甲苯2

4、：30分鐘染色整個(gè)過程大約需要四個(gè)小時(shí)，每一步都要用吸水紙蘸幾下；整個(gè)實(shí)驗(yàn)下來至少需要兩天半時(shí)間。具體問題不明白的話再問我吧，也可以上網(wǎng)去查一下別人怎么做的。