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1、p27蛋白在肝門部膽管癌的表達(dá)及臨床意義【摘要】目的探討p27蛋白在肝門部膽管癌的表達(dá)及臨床意義。方法采用免疫組化方法測定44例肝門部膽管癌及8例正常膽管組織中p27蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果p27表達(dá)的陽性率為77.2%，以低表達(dá)為主。p27的表達(dá)與腫瘤的分化、淋巴轉(zhuǎn)移及神經(jīng)浸潤顯著相關(guān)（P＜0.05）。p27蛋白高、低及陰性表達(dá)組的平均生存時(shí)間分別為84個(gè)月、72個(gè)月與65個(gè)月。p27蛋白低表達(dá)組與缺失組的生存曲線明顯低于高表達(dá)組生存曲線。結(jié)論肝門部膽管癌中p27的表達(dá)是反映肝門部膽管癌生物學(xué)行為和判斷預(yù)后的重要指標(biāo)?！娟P(guān)鍵詞】肝門部膽管癌;p27蛋白;免疫組化Expressionof
2、p27inhilarcholangiocarcinomaanditsclinicalsignificance【Abstract】ObjectiveTodiscusstheexpressionofp27inhilarcholangiocarcinomaandexploreitsclinicalsignificance.MethodsForty-fourhilarcholangiocarcinomasamplesandnormalbileductstissueswerecollectedinGeneralHospitalofPLAfrom1996to2000.Theexpressiono
3、fp27wasdeterminedbyimmuneohistochemicalmethod.ResultsThepositiverateofp27were77.2%incanceroustissues，but100%inthe10controlgroup.Meanwhile，p27expressionhadasignificantcorrelationwithdifferentiationofhilarcholangiocarcinoma，lymphnodemetastasesandperineuralinvasion.Thesurvivalcurveofthegroupwithlo
4、worabsentp27expressionwassignificantlylowerthanthatofthegroupwithhighp27expression.ConclusionOurresultssuggestthataberrantexpressionofp27maybeassociatedwiththeincidenceanddevelopmentofhilarcholangiocarcinomaandcanberegardedasprognosticmarkers.【Keywords】hilarcholangiocarcinoma;p27;immunohistoche
5、mistryp27蛋白是一個(gè)重要抑癌基因，其表達(dá)水平降低減低了它對CDK或cyclin/CDK復(fù)合物活性的抑制效應(yīng)，導(dǎo)致CDK的活化效應(yīng)遞增，使細(xì)胞能夠完成細(xì)胞周期G1～S期的重要轉(zhuǎn)換，驅(qū)動細(xì)胞周期的運(yùn)行，而使細(xì)胞增殖與分裂過快、過多乃至腫瘤形成。目前已在多種腫瘤中予以報(bào)道。但是，其在肝門部膽管癌中的表達(dá)及其作用，至今國內(nèi)外報(bào)道不多。本試驗(yàn)通過對44例肝門部膽管癌中p27的表達(dá)研究，探討其生物學(xué)意義和臨床意義。1材料與方法101.1材料選取我院1996～2000年經(jīng)手術(shù)切除、術(shù)前未行放化療、有明確病理結(jié)果及有詳細(xì)隨訪資料的肝門部膽管癌標(biāo)本44例，用中性福爾馬林固定，常規(guī)石蠟包埋。其中
6、男29例，女15例，中位年齡53歲(17～73歲)。按臨床分期，Ⅰ～Ⅱ期15例，Ⅲ期0例，Ⅳ期29例，其中Ⅳa期27例，Ⅳb期2例。其中高分化腺癌13例，中分化腺癌17例，低分化腺癌9例。對照組標(biāo)本選取行根治性切除的膽管癌標(biāo)本的遠(yuǎn)端切緣的正常膽管組織。1.2方法鼠抗人p27蛋白單克隆抗體購于北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，工作濃度為1∶20?？雇?鼠通用型免疫組化檢測試劑盒購于上?；蛴邢薰?。免疫組化染色采用兩步法（做高溫高壓抗原修復(fù)）。用已知p27蛋白陽性的正常扁桃體組織（由北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司提供）作為陽性對照，用PBS代替一抗做陰性對照。1.3結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn)參考Miche
7、langeloFiorentino［1］p27蛋白以細(xì)胞核或胞核伴胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性結(jié)果，每張切片選5個(gè)高倍視野進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，按陽性細(xì)胞數(shù)占同類細(xì)胞的百分比。p27的表達(dá)分為，高表達(dá)組：陽性細(xì)胞≥50%；低表達(dá)組：陽性細(xì)胞＜50%；及陰性表達(dá)組，無陽性細(xì)胞染色。1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用四格表χ102檢驗(yàn)。生存分析采用Kaplan-Meier法，生存率的比較采用Log-rank檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有顯著性。Kaplan-Meier曲線由Stata自
