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《棉花纖維素生物合成相關(guān)蛋白的抗體制備.pdf》由會(huì)員上傳分享，免費(fèi)在線閱讀，更多相關(guān)內(nèi)容在行業(yè)資料-天天文庫(kù)。
1、棉花學(xué)報(bào)CoRonScience2012，24(2)：106-113棉花纖維素生物合成相關(guān)蛋白的抗體制備范建’，劉緒，范春芬，黃江鋒，羅兵，彭良才，夏濤(1．華中農(nóng)業(yè)大學(xué)作物遺傳改良國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室／生物質(zhì)與生物能源研究中心／植物科學(xué)技術(shù)學(xué)院／生命科學(xué)技術(shù)學(xué)院武漢430070；2．常熟理S-學(xué)院，江蘇常熟215500)摘要：棉花纖維細(xì)胞生長(zhǎng)過(guò)程中，有多種蛋白質(zhì)參與纖維素的合成，為了深入研究這些蛋白質(zhì)的功能，制備它們的抗體具有重要意義。本研究分別用化學(xué)合成多肽和原核表達(dá)蛋白制備的可溶性蛋白、可復(fù)性包涵體以及包涵體顆粒作為抗原，制備了棉花纖維素合酶CESA1、CESA2和SUS
2、Y1、p—l，4-glucanase、p-1，3一glucanase和Callosesynthase的抗體。結(jié)果表明，化學(xué)合成多肽和原核表達(dá)蛋白均可用于抗體制各，制得的抗體可用于棉花纖維素合成相關(guān)蛋白的檢測(cè)。關(guān)鍵詞：棉花；纖維素合酶；抗體中圖分類號(hào)：$562．035．3文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A文章編號(hào)：1002—7807(2012)02—0106-08AntibodyPreparationofProteinslnvolvedinCelluloseBiosynthesisinCottonFibersFANJian，LrUXu，F(xiàn)ANChun—fen，HUANGJiang-feng，L
3、UOBing，PENGLiang-cai，XIATao(1．NationalKeyLaboratoryofCropGeneticImprovementandNationalCentreofPlantGeneResearch／BiomassandBioener-gYResearchCentreCollegeofPlantScienceandTechnologyfCollegeofLifeScienceandTechnology,HuazhongAgricultur-alUniversity,Wuhan430070，China；2．CollegeofBiologyandFoo
4、dEngineering,ChangshuInstituteofTechnology,Changshu215500，China)Abstract：Co~onfibersaresingle—celledseedsalmostentirelyconstructedofcellulose，thusservingasmodelplantsforcellulosesynthesis．PreviousresearchhasreportedthatCESA1，CESA2，CESA3，SUSY1，p-1，4一glucanase，p-1，3-glucanase，callosesyn—tha
5、seandotherproteinshaveveryimportantfunctionsduringcellulosesynthesis．Inordertovalidatethemechanismsbywhichtheseproteinsact，antibodypreparationisnecessary．HerewepreparedtheCESA2andCESA3antigensbychemicalsynthesis，andtheotherantigensbyprokaryoticexpression．TheCESA1antigenisasoluterecombinan
6、tprotein；theSUSY1antigenisarecombinantandrefoldedinclusionbody；3-1，4-glucanase，B一1，3-glucanase，andcallosesynthaseantigensarefoldinclusionbodies．AlltheantibodiesweredetectedbyWesternblotting，andtheresultssuggestthatalltheantibodies，withtheexceptionofCESA3．canbeusedtocheckthetargetprotein．T
7、hisstudyfindsthattheinclusionbodiescanbedirectlyusedastheantigenforantibodypreparation．Keywords：coaon；cellulosesynthase；antibody植物纖維素是由原生質(zhì)膜上纖維素合酶復(fù)UDP．G是纖維素合成的底物，SUSY的主要功能合體合成的，復(fù)合體以多種纖維素合酶(Cellulose是將蔗糖轉(zhuǎn)化成UDP—G，用于纖維素合成}2_。B．1，synthase，CES)為核心，結(jié)合其它各種纖維素合成4一葡聚糖酶(B．1，4-
