芪茵疏肝顆粒水提取工藝的研究

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1、罠茵疏肝顆粒水提取工藝的研究劉慶1陳良1王萍1（通訊作者）買(mǎi)爾哈巴·阿布來(lái)提2（1新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院新疆烏魯木齊830000）（2新疆醫(yī)科大學(xué)中醫(yī)學(xué)院中藥學(xué)2003-2班新疆烏魯木齊830054）【摘要】目的優(yōu)選罠茵疏肝顆粒水提取工藝。方法以綠原酸含量、黃罠甲昔含量和浸膏得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，以加水倍數(shù)，提取時(shí)間，提取次數(shù)為考察因素，采用單因素實(shí)驗(yàn)和正交設(shè)計(jì)法確定茂茵疏肝顆粒的最優(yōu)水提取工藝。結(jié)果最優(yōu)提取工藝為用10倍量的水提取2次，每次l.Oho結(jié)論最優(yōu)提取工藝可行，適合工業(yè)化大生產(chǎn)?！娟P(guān)鍵詞】

2、茂茵疏肝顆粒提取工藝單因素試驗(yàn)正交試驗(yàn)【中圖分類(lèi)號(hào)】R284.2【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A【文章編號(hào)】2095-1752（2012）19-0099-03茂茵疏肝顆粒來(lái)源于新疆醫(yī)科大學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院臨床多年使用的經(jīng)驗(yàn)方，木方具有疏肝扶脾補(bǔ)腎、消導(dǎo)化痰、兼活血消積等功效，用于治療脂肪肝（包括酒精性脂肪肝和非酒精性脂肪肝）等疾病，療效顯箸。該方由綿茵陳、黃罠、苦丁茶等組成。其中綿茵陳、黃英為君藥，綿茵陳的主要有效成分是綠原酸，而黃罠的主要有效成分是黃罠甲昔；在其制劑工藝的研究中，根據(jù)方中藥材所含有效成分的性質(zhì)，擬定綿茵陳，黃罠，

3、苦丁茶等藥材采用水提??；以綠原酸的含量、黃茂甲昔的含量和浸膏得率為評(píng)價(jià)指標(biāo)，采用單因素試驗(yàn)及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)法確定了罠茵疏肝顆粒水提提取工藝，為罠茵疏肝顆粒的工業(yè)化大牛產(chǎn)奠定基礎(chǔ)。1儀器與試劑1.1儀器Waters2695高效液相色譜儀（Waters2996二極管陣列檢測(cè)器,美國(guó)Waters公司）；Waters1525高效液相色譜儀（Waters2424蒸發(fā)光散射檢測(cè)器,美國(guó)Waters公司）；AL204電子天平［梅特勒■托利多儀器（上海）有限公司］;AG135電子天平［梅特勒■托利多儀器（上海）有限公司］。1.2

4、試劑綿茵陳、黃茂等藥材（由新疆醫(yī)科人學(xué)附屬中醫(yī)醫(yī)院提供，經(jīng)鑒定均符合《中華人民共和國(guó)藥典》2010年版一部各藥材項(xiàng)下規(guī)定）；綠原酸對(duì)照品（含量測(cè)定用，批號(hào)為110753-200413）.黃茂甲苗對(duì)照品（含量測(cè)定用，批號(hào)為110781-200613）均由中國(guó)藥品生物制品檢定所購(gòu)買(mǎi)；水為超純水；乙月青、甲醇為色譜純?cè)噭?；?shí)驗(yàn)中所用其他試劑均為分析純。2方法與結(jié)果［1?3］2.1綠原酸含量測(cè)定方法的研究2.1.1色譜條件色譜柱：SHIMADZUVP-ODS（150mm×4.6mm,5μm）；柱溫：3

5、5°C；流動(dòng)相：乙月青-0.4%磷酸（13：87）；流速：1.0mL?min-l；檢測(cè)波長(zhǎng):327nm；進(jìn)樣量10μL。2.1.2對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取綠原酸標(biāo)準(zhǔn)品15.68mg,置50mL容量瓶中，加入適量甲醇,使其溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液（濃度為313.62.1.3供試品溶液的制備按茂茵疏肝顆粒處方，精密稱(chēng)取綿茵陳等用水提取的藥材粉末（過(guò)3號(hào)篩）適量，置150mL三角瓶中，加水70mL,稱(chēng)定重量，加熱回流一定U寸間，放冷至室溫；再稱(chēng)定重量，并用水補(bǔ)足損失的溶劑量，搖勻，濾過(guò);棄去初濾液，精

6、密吸取續(xù)濾液適量，置10mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻,離心10min,取上清液，經(jīng)微孔濾膜過(guò)濾后，進(jìn)樣10μL,經(jīng)高效液相色譜法測(cè)定即可。2.1.4陰性對(duì)照試驗(yàn)精密稱(chēng)取茂茵疏肝顆粒處方中用水提取的除綿茵陳以外的其余藥材，按照2.1.3項(xiàng)下的方法制備缺綿茵陳的陰性對(duì)照溶液。用高效液相色譜法測(cè)定，進(jìn)樣量10μLo結(jié)果綠原酸標(biāo)準(zhǔn)溶液、茂茵疏肝顆粒水提液、陰性對(duì)照溶液高效液相色譜圖分別見(jiàn)圖1、圖2、圖3。結(jié)果表明，茂茵疏肝顆粒水提液中其余藥材對(duì)綠原酸的含量測(cè)定沒(méi)有干擾。2.1.5標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備精密吸取

7、貯備液各1,2,3,4mL,分別置于5mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻,即得標(biāo)準(zhǔn)溶液（其濃度分別為62.7,125.4,188.2,250.9μg?mL-l）o用上述4個(gè)標(biāo)準(zhǔn)溶液及貯備液分別進(jìn)樣分析，進(jìn)樣量為10μLo結(jié)果以進(jìn)樣濃度C對(duì)峰面積積分值A(chǔ)求出綠原酸的線(xiàn)性?xún)諝w方程為：C=3.6176×10-5A+16.4647,相關(guān)系數(shù)r二0.9999。結(jié)果表明綠原酸在62.7?313.6μg?mL?l濃度之間,與峰面積呈良好線(xiàn)性關(guān)系。2.1.6精密度試驗(yàn)日內(nèi)精密度試驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)溶液在同

8、一天內(nèi)連續(xù)進(jìn)樣6次，每次進(jìn)樣量10μLo日間精密度試驗(yàn)用標(biāo)準(zhǔn)溶液連續(xù)進(jìn)樣6d,每天進(jìn)樣一次，每次進(jìn)樣量10&mu兒。結(jié)果日內(nèi)精密度RSD=1.08%,日間精密度RSD=1.54%O表明日內(nèi)、日間精密度良好。2.1.7穩(wěn)定性試驗(yàn)取供試品溶液，在0、6、12、24、48h分別進(jìn)樣測(cè)定，每次進(jìn)樣量10μL,結(jié)果其峰面積RSD為1.98%,表明供試品溶液在48h內(nèi)較穩(wěn)定。2.1.8